Enzimas

PRÁCTICA Nº5
ENZIMAS





INTRODUCCIÓN

Las enzimas conforman un grupo de sustancias de las cuales dependen una gran parte de actividades en la vida, estas naturalmente tienen la responsabilidad de llevar acabo en el organismo reacciones químicas en condiciones benignas y a la velocidad optima, según Bohinski (1991):
Las enzimas pueden definirse como catalizadores proteicos quefacilitan las transformaciones químicas de varias sustancias. Las sustancias sobre la cual actúa la enzima se llama sustrato. La sustancia o las sustancias producidas por acción enzimática son los productos de la reacción.
La acción de las enzimas, por sus características físico-químicas, pueden afectarse por las condiciones presentes en el lugar de acción de éstas. Entre los principalesfactores que pueden modificar la acción enzimática se encuentran: el pH, la temperatura, la cantidad de sustrato, la hidratación de la enzima, la regulación alostérica, la regulación por producto y los inductores e inhibidores.
De acuerdo con Audesirk (2003): “Cada enzima ha evolucionado para funcionar de manera optima a un pH en particular, a una temperatura y con ciertas concentraciones de sales.Algunas también requieren de la presencia de otras moléculas, llamadas coenzimas, frecuentemente derivadas de vitaminas hidrosolubles, para funcionar”
Todas las enzimas muestran cierta termolabilidad, aunque para muchas de ellas el aumento de la temperatura, hasta cierto límite, acelera la velocidad de la reacción. Sin embargo, por que la mayoría de éstas son estructuras proteicas, pueden serdesnaturalizadas a medida que se aumenta la temperatura y así perder su actividad biológica. Al igual que la temperatura cada enzima posee un pH característico donde puede realizar su función (pH óptimo), cualquier variación del mismo puede afectar la acción enzimática y así afectar la velocidad de las reacciones químicas.
Las enzimas pueden ser afectadas por sustancias químicas que puedenperturbar la interacción del sustrato y de la enzima, aumentando su actividad denominándose inductores o disminuyéndola los inhibidores.
De acuerdo al tipo de inhibición estos pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza estructural con el sustrato original (inhibidor competitivo) o alterando la conformación de la enzima impidiendo la unión del sustrato (inhibidor no competitivo). Losinhibidores permiten determinar la especificidad de la enzima por el sustrato.

OBJETIVOS GENERAL
Estudiar diversos efectos que intervienen en la actividad enzimática de la amilasa.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
* Visualizar el efecto del pH sobre la actividad de la amilasa.
* Determinar el efecto de la temperatura sobre la actividad de la amilasa.
* Identificar la presencia deinductores e inhibidores enzimáticos.


















MATERIALES Y MÉTODOS
Tubos de ensayos | Solución de lugol |
Beakers | Agua destilada |
Pipetas | Solución de almidón al 1% |
Goteros | Reactivo Benedict |
mechero | NaCl 0,9% |
Solución de yodo | Solución buffer pHs 4,0; 7,0 y 10 |
| Refresco |

Experimento 1.Visualizar el efecto del pH sobre la actividad de la amilasa.
Experimento 2. Determinar el efecto de la temperatura sobre la actividad de la amilasa
* Se Tomo 4 tubos de ensayo y agregaron a cada uno de ellos 1 ml de solución de saliva en proporción 1:9 y luego se llevo a cada tubo a la temperatura indicada y se dejo incubar por 5 minutos.
* Luego de incubar se le añadió a cada tubo 5 ml desolución de almidón al 1%.
* Dejando los tubos en su temperatura correspondiente, se procedió a realizar la prueba de yodo a cada tubo al tiempo indicado luego de agregar el almidón.
* Al cabo de 12 minutos, fue relizada la prueba de Benedict a cada uno de los tubos de ensayos.
* Finalmente se interpretaron los resultados obtenidos.

Experimento 3. Identificar la presencia de...