Estudiante

METODOLOGIA
En el laboratorio observamos cada uno de los procesos que se realizaron para la obtención del ADN, el cual plasmaremos y resumiremos en breve todos los pasos que se tuvieron en cuentapara este laboratorio.
Uno de los procesos primarios en este procedimiento de aislamiento del ADN son:
1.) tomar 500 µl de sangre total de las muestras y agregarla en el tubo eppendorff quecontiene 1,5 ml de Buffer de Lisis de Glóbulos Rojos.
Este buffer de lisis sirve para destruir los globulos rojos que contiene la muestra por eso el color rojo vino tinto.
2.) Tapar los tubos y agitarpor inversión hasta que se lisen los glóbulos rojos y esperar que tomen un color rojo.
3.) Centrifugar a 12000 RPM por 3 min los tubos eppendorf de 2.0 ml.
Este es un método donde podemosfísicamente separar solidos de liquidos o sustancias mas densas, para este caso separar los globulos blancos.
4.) Desprender los pellet y destapar los tubos colocándolos en una gradilla.
5.) Agregar1ml de Buffer de Lisis de Glóbulos Rojos a los tubos eppendorf de 2.0 ml que tienen el pellet desprendido, tapar los tubos, agitar por inversión y dejar de 2 o 3 minutos antes de llevarlos a lacentrifuga. Después llevarlo a centrifugado de 12000RPM por 3 minutos.
6.) En este procedimiento hay que destacar que el cuidado y precisión en la limpieza del tubo para dejar no mas el pellet es decuidado absoluto.
7.) Agregar 500 µl de buffer de lisis nuclear y 333ul de solución de precipitado de proteínas a cada tubo y taparlo.
8.) Agitar entre 30 y 40 segundos a cada tubo eppendorf, sele puede dar agitación como máximo a 4 tubos al tiempo. después Centrifugar a 12000 RPM por 3 min.
9.) Pasar el sobrenadante del tubo de 2ml a del recipiente con el de volumen de 1,5 ml.10.) Adicionar 500 µl de isopropanol (-20°C), tapar los tubos, mezclar por inversión y cuantificar el ADN de acuerdo al tamaño de la hebra condensada y apuntar la cantidad en el tubo eppendorf...