Extracción y estudio cualitativo de proteínas en muestras vegetales

INTRODUCCIÓN

Las proteínas son compuestos orgánicos constituidos por muchos aminoácidos unidos por enlaces peptídicos que intervienen en diversas funciones vitales esenciales en los seres vivos. Los aminoácidos poseen por lo menos un grupo carboxilo y un grupo amino, existen 20 aminoácidos codificados exactamente para pertenecer a una proteína. Cada proteína posee una secuencia propia deresiduos, tiene forma, función y tamaño que la hace única. Pero para conocer cada una de estas propiedades pertenecientes a las proteínas primero se debe realizar la extracción de las mismas de la muestra que este bajo estudio.

La extracción de proteínas que se realizó en el laboratorio fue hecha a la harina previamente preparada de la arveja (Pisum sativum L), se hizo una extracción acuosa paratodas aquellas proteínas solubles en agua y otra extracción para aquellas solubles en soluciones salinas (como el NaCl). Después se hicieron las pruebas para reconocer proteínas al ser desnaturalizadas en muestras de las dos extracciones así como de 3 soluciones patrones que nos sirvieron como testigos de pruebas positivas de ambos procedimientos, dichas pruebas fueron las de BIURET y la deprecipitación proteica con metales pesados.

Por su importancia en la vida, el estudio de las proteínas se han convertido en tema central y detallado de esta práctica, para que como estudiantes podamos realizar dichas pruebas en futuro dentro de nuestra carrera y dar las mejores recomendaciones basadas en el conocimiento bioquímico adecuado.















RESULTADOS

Los extractos(acuoso y Salino) fueron obtenidos de una muestra vegetal, que en este caso es de harina de Arveja (Pisum sativum L)



▪ EXTRACCIÓN ACUOSA DE PROTEINAS Y EXTRACCIÓN SALINA DE PROTEINAS

Se extrajo una cantidad de aproximadamente 75 mL de solución acuosa de la harina de arveja así como de 75 mL de solución salina.



▪ PRUEBA DE PRECIPITACIÓN PROTEICA CON METALES PESADOS

Seutilizo como metales pesados para esta prueba el Nitrato de Mercurio (Hg (NO3)2) y el Acetato de plomo ([CH2coo]2 Pb) al 2 %, los resultados obtenidos se resumen en el siguiente cuadro:

Cuadro 1. Resumen de la prueba cualitativa de metales pesados realizado a las soluciones patrones y extractos de proteínas.

|MUESTRA A ANALIZAR |OBSERVACIONES DE LA PRUEBA METALES PESADOS|DICTAMEN |
|Extracto Acuoso |Precipitado color amarillo |PRUEBA POSITIVA |
|Extracto Salino |Precipitado color blanco |PRUEBA POSITIVA |
|Peptona |Precipitado color blanco |PRUEBAPOSITIVA |
|Albumina |Precipitado color melón |PRUEBA POSITIVA |
|Caseína |Precipitado color blanco |PRUEBA POSITIVA |


Fuente: Manual de Laboratorio de Bioquímica, FAUSAC

En todas las muestras analizadas hubo un precipitado proteico, esdecir que la prueba fue de un 100% efectiva. Por lo que determinamos que evidentemente nuestros extractos poseían proteínas.





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Figura 1. Resultado de la prueba en Albumina.

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Figura 2. Resultado de la prueba en Caseína

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Figura 3. Resultado de la prueba en Peptona

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Figura 4. Resultado de la prueba en Extracción Acuosa



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Figura 5.Resultado de la prueba en Extracción Salina



▪ PRUEBA DE BIURET

Después de colocar de 20 a 35 gotas del reactivo de Biuret a cada muestra los resultados obtenidos son:

Cuadro 2. Resultados de la prueba de BIURET realizadas a las soluciones patrones y extractos de soluciones

|MUESTRA ANALIZADA |COLORACIÓN OBTENIDA |DICTAMEN...