Histologia

~HISTOLOGÍA Y EMBRIOLOGÍA BUCODENTAL~
1° UNIDAD

*HISTOLOGÍA: ciencia multidisciplinaria que integra conocimientos de bioquímica, fisiología, biología celular, citología y genética para comprender la estructura y función de los tejidos.
*EMBRIOLOGÍA: ciencia multidisciplinaria que integra conocimientos de anatomía, fisiología, biología molecular, celular y tisular para comprender losprocesos que ocurren en el desarrollo prenatal que conducen a la formación de un producto viable.

~TÉCNICAS DE ESTUDIO~

*Técnica histológica:
a) Microscopía óptica
a. Técnica histológica por inclusión en parafina: proceso físico-químico que conserva la estructura celular y la organización tisular de una muestra y la prepara para su observación al microscopio. Pasos:
i. Toma de muestra: retirarun trozo de tejido de máximo 1 cm3 de un organismo vivo (biopsia) o muerto (necropsia).
ii. Fijación: preserva la estructura: evita autolisis y degradación o putrefacción por bacterias y otros microorganismos. Estabiliza la muestra y evita cambios de volumen durante el proceso. Permite su tinción. Se preservan las proteínas para los estudios morfológicos (pero en general depende del objeto deestudio).
ii.i.1. Métodos físicos: utiliza microondas, temperatura de congelación (la más usada; nitrógeno líquido) o secado del tejido.
ii.i.2. Métodos químicos: utiliza soluciones acuosas compuestas por moléculas fijadoras que interactúan con las moléculas celulares, estabilizándolas e impidiendo su degradación.
ii.i.2.a. Por inmersión de la muestra en solución fijadora.
ii.i.2.b. Por perfusiónin situ en animales de experimentación.
~Fijadores:
*Aldehídos: formaldehido (al 10%), glutaraldehído, paraformaldehído, acrolein y glyoxal.
~Formalina neutra (formol al 10% con pH de 7.0)
*Agentes oxidantes: teróxido de osmio, permanhganatos y dicromato de potasio
*Agentes desnaturalizantes o coagulantes de proteínas: ácido acético, alcoholes metílico y etílico.
*Otros agentes queforman puentes: carbodimides.
*Agentes físicos: temperatura de congelación y microondas
*Otros: cloriuro de mercurio, ácido pícrico y fijadores no aldehídos.
iii. Deshidratación: se lleva a cabo mediante la inmersión de la muestra en soluciones crecientes (80%, 96% y 100%) de alcohol (etanol). Remueve el fijador y el agua para remplazarlos con alcohol.
También se usa: metanol, isopropil yacetona.
iv. Aclaramiento: se lleva a cabo con sustancias miscibles con el alcohol y la parafina o con un índice de refracción similar al de las proteínas. => tejido traslúcido. Extrae el agente deshidratante del tejido y lo sustituye por Xilol, miscible con el medio de inclusión.
Agentes deshidratantes: xileno (Xilol), tolueno, cloroformo, aceites de frutos cítricos, metil salicilato y metilbezoato.
Criterios para seleccionar el agente aclarador: rapidez para remover el agente deshidratante, facilidad para remover la parafina, que provoque mínimo daño tisular, toxicidad, $ y flamabilidad.
v. Infiltración: se infiltra el tejido con parafina líquida, a presión atmosférica normal y al vacío. Facilita la inclusión de tejido.
Medios de embebido: resinas acrílicas o epóxicas, agar, gelatinay celoidina.
Selección del medio de embebido: necesidad de cortes finos, el calor causa daño al tejido, el metió de impregnación no da suficiente soporte, cuando los agentes del procesamiento remueven o destruyen componentes tisulares de interés.
vi. Inclusión: Se elabora un bloque de parafina que contiene en su interior a la muestra. Facilita el corte con el micrótomo.
vii. Corte: se realizacon un micrótomo. Grosor promedio de 5 micras o micrómetros (mm).
vii.i.1. Los cortes se extienden en un baño de agua caliente a 10° C por debajo del punto de fusión de la parafina.
vii.i.2. Los cortes extendidos se secan para continuar con el proceso.
viii. Coloración: la mayoría de las estructuras celulares y tisulares son transparentes al MO de campo claro, por lo que es necesario teñirlos...