EXPERIMENTO 2

METODOS CUANTITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS

REQUISITOS Repasar las estructuras de los 20 L-α aminoácidos (AA), que forman las proteínas y lascaracterísticas de las proteínas.

OBJETIVOS Identificar por métodos colorimetritos los 20 L-α aminoácidos (AA), que forman las proteínas, basados en las reacciones de los grupos R

1. FUNDAMENTOS Por laestructura peptídica y la presencia de determinados grupos (grupos R), las proteínas pueden reaccionar con una variedad de agentes originándose productos coloreados. Estas reacciones son la base para ladeterminación cuantitativa y cualitativa de las proteínas. Por presentarse variaciones en la composición de los aminoácidos de las diferentes proteínas, se manifiestan diferentes colores y grados deintensidad para una misma reacción, íntimamente relacionado con la naturaleza de la proteína analizada. 1.1 1.1.1 Fundamentos químicos de las pruebas. Prueba de la ninhidrina (Hidrato detricetohidrindeno).

Todas aquellas sustancias que presentan al menos un grupo amino y uno carboxilo libre, reaccionaran con la ninhidrina. La positividad se manifiesta por la aparición de un color violáceo oamarillo. Debido a que las proteínas y los aminoácidos, poseen esta característica, la reacción sirve para identificarlos. Algunas soluciones de amonio y aminas, dan la coloración característica,aparentemente debido a una oxidación y reducción intramolecular de la ninhidrina en presencia de amoníaco. Los aminoácidos porina e hidroxiprolina, que no poseen grupo amino sino imino (-NH-), dan un colorrojo que pasa rápidamente a amarillo. La reacción se muestra en la figura 1 27

Figura 1 Reacción de la prueba de la ninhidrina
CO C CO OH R + H H C OOH Ninhidrina 2 H 2O Aminoácido N CH

OHCO C CO N

R CH C OOH

CO C CO

H N

R C C OOH

(BASE DE SCHIFF) R CO C CO N H2 H
+

C H

H 2O O C O2

(2-amino-1,3-dicetohidrindeno)

CO C CO Ninhidrina

CO H + NH2 2 H2O CO C... [continua]

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(2010, 07). Identificacion aminoacidos. BuenasTareas.com. Recuperado 07, 2010, de http://www.buenastareas.com/ensayos/Identificacion-Aminoacidos/493570.html

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