EXPERIMENTO 2

METODOS CUANTITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS

REQUISITOS Repasar las estructuras de los 20 L-α aminoácidos (AA), que forman las proteínas y las características de las proteínas.

OBJETIVOS Identificarpor métodos colorimetritos los 20 L-α aminoácidos (AA), que forman las proteínas, basados en las reacciones de los grupos R

1. FUNDAMENTOS Por la estructura peptídica y la presencia de determinados grupos (grupos R), las proteínas puedenreaccionar con una variedad de agentes originándose productos coloreados. Estas reacciones son la base para la determinación cuantitativa y cualitativa de las proteínas. Por presentarse variaciones en la composición de los aminoácidos de las diferentesproteínas, se manifiestan diferentes colores y grados de intensidad para una misma reacción, íntimamente relacionado con la naturaleza de la proteína analizada. 1.1 1.1.1 Fundamentos químicos de las pruebas. Prueba de la ninhidrina (Hidrato detricetohidrindeno).

Todas aquellas sustancias que presentan al menos un grupo amino y uno carboxilo libre, reaccionaran con la ninhidrina. La positividad se manifiesta por la aparición de un color violáceo o amarillo. Debido a que las proteínas y losaminoácidos, poseen esta característica, la reacción sirve para identificarlos. Algunas soluciones de amonio y aminas, dan la coloración característica, aparentemente debido a una oxidación y reducción intramolecular de la ninhidrina en presencia de amoníaco.Los aminoácidos porina e hidroxiprolina, que no poseen grupo amino sino imino (-NH-), dan un color rojo que pasa rápidamente a amarillo. La reacción se muestra en la figura 1 27

Figura 1 Reacción de la prueba de la ninhidrina
CO C CO OH R + H HC OOH Ninhidrina 2 H 2O Aminoácido N CH

OH

CO C CO N

R CH C OOH

CO C CO

H N

R C C OOH

(BASE DE SCHIFF) R CO C CO N H2 H
+

C H

H 2O O C O2

(2-amino-1,3-dicetohidrindeno)

CO C CO Ninhidrina

CO H + NH2 2 H2O CO [continua]

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(2010, 07). Identificacion aminoacidos. BuenasTareas.com. Recuperado 07, 2010, de http://www.buenastareas.com/ensayos/Identificacion-Aminoacidos/493570.html

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