Manual

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE HEMATOLOGIA

E.S.E. CENTRO DE SALUD RICAURTE
LABORATORIO CLINICO

DERLY MILENA AYA
BACTERIOLOGA Y LAB. CLINICO
2006

TOMA DE MUESTRA

□ Se elige la vena que favorece la toma de la muestra, preferiblemente de la región venosa antecubital, porque a este nivel la piel es fina y móvil y las venas son de grueso calibre y relativamente superficiales. Cuando estelugar no favorece para la punción, se observan otras venas como de la mano o de la cara anterior del antebrazo.
□ El personal encargado de la toma de muestras se colocara los guantes de látex, previo lavado de las manos.
□ Si las venas no son muy superficiales se coloca un torniquete 5cc arriba del sitio elegido para puncionar, se le pide al paciente que empuñe la mano y si es necesario sefrota suavemente con la mano de quien va a puncionar el lugar de la vena elegida. Si la vena es superficial solo se le pide al paciente que empuñe la mano.
□ Una vez elegida el área de punción se esteriliza con algodón empapado con alcohol antiséptico, se emplea jeringa desechable y se procede a la punción.
□ La cinta elástica debe retirarse después de introducida la aguja en la vena, seaspira la sangre con la jeringa y una vez retirada, se presionará la zona puncionada con un algodón empapado en alcohol antiséptico.
□ Cuando se va a tomar únicamente para exámenes de hematología, se toman 2cc de sangre, cuando además el paciente tiene orden para exámenes de química clínica y/o inmunología se toman 5cc. La muestra para CH se almacena en los tubos tapa lila que son previamenteorganizados y deben contener 2 gotas de EDTA.

FROTIS SANGUINEO Y COLORACION

Para el frotis sanguíneo se emplea el método de los dos portaobjetos:
□ Identificar la lámina.
□ Colocar una pequeña gota de sangre no más de 3 mm de diámetro de un portaobjetos a 2 cm de uno de los extremos.
□ Colocar el canto de otro portaobjetos, por la parte anterior a la gota de sangre, sobre la superficiedel primer portaobjetos, formando un ángulo de 45 grados y desplazarlo suavemente hacia atrás, hasta que alcance la gota de sangre.
□ Esperar que por capilaridad toda la sangre se distribuya uniformemente, es aconsejable que la sangre no llegue a los lados del portaobjetos, sobre el que se realiza la extensión.
□ Deslizar suavemente y a velocidad moderada un portaobjetos sobre el otro ensentido longitudinal, hasta que la gota de sangre quede bien extendida, sobre la superficie del primer portaobjeto. El grosor del frotis sanguíneo puede variar de acuerdo al ángulo empleado durante la extensión, si es superior a 45° será gruesa y corta y si es inferior será larga y fina. Se deja secar a temperatura ambiente y en posición horizontal.

Para la coloración, una vez seco el extendido nose deja pasar más de una hora:
□ Se aplica 1 cm colorante de Wright por 1 minuto.
□ Se aplica buffer Giordano (que debe mantenerse en la nevera, pero a temperatura ambiente en el momento de emplearlo) por 6 minutos.
□ Se lava la lámina con agua de chorro, se seca por la parte posterior y se deja secar a temperatura ambiente en posición vertical.

HEMOGLOBINA

Servir en un tubo de ensayo2,5 ml de Drabkin y tomar 10 ul de sangre con anticoagulante, limpiar muy bien la punta y llevar al fondo del tubo y aplicar, enjuagar la punta con el reactivo en la parte superior. Homogeneizar el tubo por inversión con movimientos suaves. Dejar en reposo de 5 a 10 minutos. Leer a 540 nm, llevando a cero con el blanco del reactivo y calibrando con el patrón de hemoglobina.

HEMOGLOBINA:ESPECTROFOTOMETRICA ICSH

FUNDAMENTO
El ión ferroso de la HB se oxida a ión férrico por acción del ferricianuro potásico formándose hemiglobina (metahemoglobina). La hemiglobina reacciona con el cianuro para formar cianhemiglobina (cianmetahemoglobina) que se puede medir por espectrofotometría.

REACTIVOS

Reactivo concentrado y patrón de Hb, deben guardarse en refrigeración, bien cerrados,...