Membrana de quitosano para la separación de d-l tirosina

Membrana de Quitosano para la Separación de D-L Tirosina
Andrés Takara, Adolfo Acosta, N. Ariel Ochoa, José Marchese Instituto de Física Aplicada (INFAP) Universidad Nacional de San Luis-CONICET
andrestakara@yahoo.com.ar

Introducción Los enantiómeros son sistemas físicos y químicos idénticos, con propiedades ópticas diferentes. La necesidad de separar dichos compuestos resulta importantepara lograr una determinada función. La tirosina es un aminoácido que no es esencial como otros para la vida humana pero, el enantiómero Ltirosina se utiliza en tratamientos psicológicos, contra la fatiga en atletas y en procedimientos para adelgazar, etc.[1] Actualmente se están investigando otras aplicaciones para la L-tirosina, tales como, el tratamiento de hipotiroidismo, mal de Parkinson eimpotencia sexual masculina, entre otras. Por estas razones, la separación de D, L tirosina presenta un indudable interés farmacológico. Los métodos clásicos de resolución de mezclas racémicas son: cristalización, electroforesis, intercambio iónico y distintos tipos de cromatografía, sin embargo, en los últimos años se están desarrollando procesos con membranas quirales como una nueva tecnología parala separación de enantiómeros [2]. El quitosano es un tipo de polisacárido natural abundante que puede ser aprovechado como

material de membrana debido a sus centros quirales y funcionales, tales como grupos amino e hidroxilo [3][4].

a su rico contenido de grupos

El objetivo de este trabajo es presentar los resultados de un estudio preliminar de la síntesis de una membrana de quitosano,evaluando sus propiedades estructurales y su eficiencia en la separación de D-L tirosina. Experimental Preparación de la membrana: La preparación de films se efectuó siguiendo los siguientes pasos: Se disolvió 2% de quitosano (SIGMA) en ácido fosfórico al 1% (Fluka), luego se le agregó 0,5% de glicerina (Biopack). La solución obtenida se vertió en cajas de Petri para su moldeado colocándose enestufa a 40 °C durante 48 h. Los films obtenidos fueron entrecruzados con soluciones de NaOH de diferentes concentraciones (0,1 a 2 M), por un periodo de 48 h y posteriormente se lavaron con abundante H2O desionizada. Las membranas obtenidas se mantuvieron en agua desionizada a 4º C hasta su utilización. Pruebas de Solubilidad: Las membranas se colocaron en contacto por 48 h con distintos solventes:acetona, etanol, N,N-dimetilformamida (SIGMA), agua desionizada a 25 °C y 50°C. Índice de Hinchamiento (IH): El índice de hinchamiento se calculó con la Ec.(1). IH % = (WH-WS)/WS .100 (1) donde WS (g) es el peso de membrana secada al vacío y WH (g) es el peso de membrana luego de contactarla con agua a diferentes tiempos (hasta 24 h) Propiedades mecánicas Las propiedades mecánicas de resistencia ala tracción (TS) y deformación (E) de la membrana preparada fueron evaluadas utilizando el equipo "Comten Industries " Serie 94 CV a una velocidad de tracción constante de 5 mm/min. Para la relajación completa de las estructuras poliméricas y para estandarizar el procedimiento experimental, las pruebas se efectuaron a una T = 25ºC y a una humedad relativa (Hr = 70%). Los resultados finales sonvalores promediados de tres medidas. El espesor de la membrana se midió utilizando un micrómetro Köfer (precisión ±1μm). Estudio de Difusión: La muestra se colocó entre dos hemiceldas de una celda de difusión, cada una conteniendo un volumen de 7 mL de solución de tirosina 2mM y de H2O desionizada, respectivamente. Ambas soluciones se mantuvieron a una T = 25 °C y fueron agitadas a 150 rpm. Se tomaronmuestras de las soluciones de alimentación y aceptora a diferentes tiempos para posteriormente ser analizadas. Determinación de D-L Tirosina: La concentración de los isómeros de tirosina se determinó en un equipo de HPLC Gilson 330, con un detector UV–VIS a λ = 273 nm, utilizando una columna quiral. Se calculó el exceso enantiomérico mediante la Ec (2)
ee (%) = AD - AL x 100 AD + AL

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