Metodos para la determinacion de glucosa

METODOS PARA LA DETERMINACION DE LA GLUCOSA

MÉTODOS BASADOS EN EL PODER REDUCTOR DE LOS HIDRATOS DE CARBONO.

* Reducción del cobre: se basa en la capacidad que tiene la glucosa parareducir los iones cúpricos (Cu2+) a iones cuprosos (Cu+). Por calentamiento, los iones cuprosos pueden formar oxido cuproso (Cu2O), el cual puede ser detectado por diversos métodos. El más usado es elmétodo de Benedict, el cual detecta azucares reductores totales en orina. Este método es usado para determinar o detectar defectos genéticos del metabolismo de los hidratos de carbono en niños, en cuyaorina aparecen azucares que son glucosa.

Esquema de los métodos de reducción del cobre.

* Método de la o-toluidina: se basa en la condensación de azucares reductores conorto-toluidina en un medio de ácido acético glacial produciéndose en cromógeno. El color formado se mide mediante un espectrofotómetro a 630nm, siendo la intensidad de color de la solucióndirectamente proporcional a la cantidad de glucosa existente en la misma. Se trata de un método en desuso, entre otras razones por que emplea reactivos corrosivos, no es posible automatizarla, la o-toluidina espotencialmente cancerígena y esta sujeto a muchas interferencias.

METODOS ENZIMATICOS.
* Método de hexoquinasa: es un método de referencia, se basa en la fosforilación de la glucosa por laenzima hexocinasa, formándose glucosa-6-fosfato; y en una reacción posterior catalizada por glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa (G6PD), reducción de la coenzima NAPD o NAPDH, la reacción se mide medianteun espectrofotómetro a 340 nm, y el incremento de absorbancia es directamente proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.

Esquema del método enzimático con glucosa oxidasa.Esquema del método de hexoquinasa

* METODO DE GLUCOSA OXIDASA: se basa en la oxidación de la glucosa por la enzima glucosa oxidasa,...