Practica api.. microbiologia

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  • Publicado : 28 de mayo de 2011
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Discusión:
El sistema API se utiliza para la identificación bacteriana, con una serie de pequeños depósitos denominados microtubulos y que contienen los sustratos deshidratados para diversas pruebas, los cuales se reconstituyen con la suspensión bacteriana a probar. Después de la incubación las reacciones se leen ya sea por el color o bien después de agregar reactivos para la revelación. (1)Se tomo dos colonias de salmonella typhimurim y se resuspendieron en solución salina.
Se sembró la Sallmonella en pruebas bioquímicas y también se inocularon los panes del sistema API para Gram negativos, solo se realizaron estos debido a que no se contaba con la otra serie de pruebas para Gram positivos.
Se incubo los panes de pruebas durante 24 horas y se procedió a revelar algunas de laspruebas y otras se observo su coloración.
La prueba ONPG en la cual dio negativa. Esta prueba demuestra la presencia o la ausencia de la enzima B- galactosidasa mediante el uso del compuesto organico o-nitrofenil-β-D-galactopiranósido (ONPG). Diferencia rápidamente microorganismos fermentadores lentos de la lactosa de los microorganismos lactosa negativos. El ONPG es incoloro y vira a amarillocuando la β-galactosidasa lo hidroliza para obtener o-nitrofenol mas galactosa. (2)
ADH dio negativo. En ella se evalúa la arginina deshidrolasa es una enzima que actúa sobre la L-arginina produciendo alcalinidad como resultado final sus productos son la L-citrulina y amoniaco. Salmonella debe de dar positivo pero la lectura debe realizarse cuatro días después de la inoculación (3)
Dio positivopara LDC (lisina descarboxilasa) en el microtubulo de API y también en la prueba bioquímica (K/K). Descarboxila la lisina para formar cadaveriana esta hace virar el indicador rojo de fenol de amarillo a rojo, además se producen ácidos cuando se fermenta la glucosa (1)
En descarboxilacion de ornitina para formar putrescina se utiliza la prueba ODC que evalua a la enzima ornitina descarboxilasa.Determina la capacidad enzimática de un microorganismo de descarboxilar un aminoácido para formar una amina con la resultante alcalinidad. Ayuda a la diferenciación de s. typhi (-) de otras especies de salmonella (+).(2) En el tubo MIO que se le inoculo la misma cepa no presento crecimiento ni cambio de coloración, lo cual indico que se realizo mal la prueba en el sistema API. En esta mismo medio(MIO) se le agrego el reactivo Kovacs para evaluar la producción de indol dando como resultado negativo.
En cuanto a la utilización del citrato se observa azul verdoso presuntamente negativo. La prueba CIT se observa como verde negativo y en caso positivo azul oscuro o turquesa. (5) De igual manera se inoculo un medio de prueba bioquímica con citrato en la cual se observo el mismo color que elsistema API. S. typhimuriun no puede utilizar este como fuente de energía dando negativo (1)
Se inoculo en medio Kligler para evaluar la fermentación de azucares y producción de gas. Presento K/A con producción de gas en el fondo. Este género de bacterias fermentan la glucosa pero no la sacarosa ni la lactosa (con algunas excepciones) y usualmente producen H2S en agar tripe azúcar hierro. (5)
Seobservo en el microtubulo la prueba para H2S en la cual dio positivo. Determina se ha liberado enzimáticamente acido sulfidrico para producir una reacción coloreada visible, negra, en presencia de un sistema indicador de H2S. Las especies de salmonella por lo general son positivas para la producción de H2S. (2)
Los microorganismos que tienen la enzima ureasa hidrolizan la urea, liberan amoniacoproduciendo un cambio de color (4) la salmonella no crece en este medio y en los microtubulos API da negativo ya que este microorganismo carece de la enzima ureasa. Comparando con la prueba bioquímica correspondiente también dio negativo confirmando el resultado obtenido.
En esta práctica se inoculo con salmonella tiphy en el microtúbulo para TDA dio negativo. Se utiliza para detectar indol y...
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