Practica

MICROSCOPIO ÓPTICO DE BARRIDO CONFOCAL

* INTRODUCCIÓN:
La microscopía Confocal es una mejora sustancial de las técnicas clásicas de microscopía óptica (campo
claro y fluorescencia),resultando de gran interés para diversas ramas de la ciencia tales como medicina, biología, materiales, geología, etc. Su éxito se debe a la obtención de imágenes de mayor nitidez y contraste, mayor resoluciónvertical y horizontal y a la posibilidad de obtener “secciones ópticas” de la muestra, permitiendo su estudio tridimensional.

* TIPO DE LASER QUE UTILIZA:
* ESPEJOS DICROICOS:

*DIAFRAGMA: Es un microscopio óptico que incorpora dos diafragmas:
1) Un diafragma de iluminación, generalmente de tamaño invariable y localizado tras la fuente luminosa denominado Pinhole deExcitación, cuya utilidad es eliminar la luz proveniente de planos superiores e inferiores al plano focal, aumentando con ello la claridad y resolución de la imagen.
2) Un diafragma de detección, de tamañovariable situado delante del fotodetector denominado Pinhole de Emisión. La utilidad de este diafragma de detección, es eliminar la luz proveniente de planos superiores e inferiores al plano focal,aumentando con ello la claridad y resolución de la imagen. Esta capacidad de obtener SECCIONES ÓPTICAS, es la característica principal y exclusiva del microscopio confocal.

* FLUOROCROMOS:

Losfluorocromos son sustancias que tienen la propiedad de emitir un fotón de una longitud de onda determinada cuando captan (son exitados) por un fotón incidente de una longitud de onda característica.Uno de los problemas de la utilización de fluorocromos en microscopía de fluorescencia es la pérdida de ésta debido a las grandes intensidades de luz empleadas. Las muestras empleadas en esta técnicano pueden observadas durante largos periodos de tiempo debido a la desaparición de la fluorescencia ('fluorescence fading'). Se han desarrollado métodos que permiten reducir este efecto, entre...