Practica

PRACTICA N.5
CURVA ESTANDAR DE LA CASEÍNA
INTRODUCCIÓN:
El sulfato alcalino de cobre reacciona con compuestos que contienen dos o mas enlaces peptídicos dando un complejo de coloración violeta. Laintensidad del color obtenido es una medida del número de enlaces peptídicos ya que cualquier compuesto que contenga dos grupos carbonilos unidos por un átomo de nitrógeno o de carbono da unresultado positivo.Pero la prueba de Biuret se puede emplear para la determinación cuantitativa de proteína, aunque existen otros métodos más confiables como el caso del método Folin-Lowry que se basa en lamisma reacción del fosfomolibdato por la tirosina y el Triptofano presentes en la proteína
MATERIALES:
* Pipeta Serológicas
* Tubos de ensayo
* Matraz aforado
* Gradilla
* Bañocon temperatura controlada
* Espectofotometro
* Celdas para el espectofotometro
REACTIVOS:
* Caseína
* Sulfato de cobre pentahidratado
* Fosfato de potasio dibasico
*Hidroxido de sodio
* Yoduro de potasio
* Tartarato de sodio y potasio

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA:
* Elaboramos una solución de caseína de _____ mg/ml
* Disolvimos la caseína en buffer defosfatos 0.2 M con PH 7 en el _____% del volumen total
* Calentamos en agua hirviendo durante 15 min , enfriamos y tomamos alícuotas
* Adicionamos agua hasta que obtuvimos el volumen total en___ ml

* Elaboramos 10 diferentes concentraciones siendo la menor de .1
Reactivo Biuret:
* Disolvimos __g de sulfato de cobre y __ g de tartarato de sodio y potasio en 500 ml de NAOH 0.2M
* Añadimos ___ g de yoduro de potasio
* Aforamos a 1000 ml en una sosa de 0.2 M

Para realizar el método de biuret:
* Añadimos __ ml de proteína __ ml de cada reactivo de biueret* Calentamos a 37 * C durante 10 min
* Se preparo un blanco con agua destilada
* Leímos la absrobancia a 540 nm

GRAFICA

Mg/ml | Absorbancia |
0 (blanco) | 0(blanco) |
0.1 |...