Precipitación de proteínas
Introducción:
La precipitación de proteínas es uno de los procedimientos más empleados en los procesos metodológicos de la bioquímica moderna.
De ahí que seanecesario tener claros los principios en que se basan los diversos tipos de precipitaciones.
Cuando la proteína no ha sufrido ningún cambio en su interacción con el disolvente, se dice quepresenta una estructura nativa. Se llama desnaturalización de las proteínas a la pérdida de las estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y cuaternaria), quedando la cadenapolipeptídica reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura tridimensional fija.
Estado nativo
Estado desnaturalizado
Cualquier factor que modifique la interaccion de la proteínacon el disolvente disminuirá su estabilidad en disolución y provocará la precipitación. Así, la desaparcioón total o parcial de la envoltura acuosa, la neutralización de las cargas eléctricasde tipo repulsivo o la ruptura de los puentes de hidrogeno facilitará la agregación intermolecular y provocará la precipitación. La precipitación suele ser consecuencia del fenómeno llamadodesnaturalización y se dice entonces que la proteína se encuentra desnaturalizada.
Objetivos:
El alumno debe tener claras las distintas formas de precipitar a las proteínas y sus usos.Materiales:
1 Huevo
1 Gasa
1 Vaso de precipitado de 250mL.
1 Probeta de 20mL.
1 Vaso de precipitado de 50mL.
14 tubos de ensaye 18x150
1 gradilla.
Procedimiento:
Observaciones:Reacción de Biuret
Tubo
Color
1
Azul Semi-fuerte
2
Azul fuerte
3
Azul fuerte
Precipitación por solventes orgánicos
Tubo
Precipitado
1
Turbidez clara
2
Poca turbidez
3
Muchaturbidez
4
Nada
Precipitación por formación de sales
Tubo
Precipitado
1
Si hay cantidad buena
2
Nada
3
Si hay mucha precipitación
4
Nada
5
Cantidad media
6
Nada
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