Preparar Medio De Cultivo (Ecoli)
Páginas: 8 (1852 palabras)
Publicado: 14 de mayo de 2012
Preparación de los medios de Cultivo
Bacteria: Escherichia coli (Enterobacteria)
* Material y Equipo:
* 1 mechero
* Tela de Asbesto
* 1 agitador
* 1 magneto
* 1 matraz de 500 ml
* 1 balanza
* 1 espátula
* 1 probeta de 250 ml
* 1 caja de Petri estériles desechables
* Masking tape
* Papel aluminio
* Reactivos para el medio de cultivo(Kliger)
* Extracto de carne
* Extracto de levadura
* Peptonas
* Lactosa
* Destroza
* Cloruro Sódico
* Citrato amónico y Fe2
* Rojo fenol
* Agar
* Autoclave
* Formulación del medio de cultivo:
-Kliger: su composición es: extracto de carne (3gr/l), extracto de levadura (3gr/l), peptonas (20gr/l), lactosa (10 gr/l), destroza (1gr/l),cloruro sódico (5gr/l), citrato amónico y Fe2+ (0.50gr/l), rojo fenol (0.03gr/l) y agar (15gr/l).
Para elaborarlo primero suspendemos 58gr del polvo en 1l de agua destilada y lo llevamos a ebullición. Los esterilizamos al autoclave durante 15 minutos a 121ºC. Luego lo dejamos enfriar.
* Procedimiento:
* Primero se prepara el medio de cultivo (Formulación) a utilizar.
* Después secalcula cuantos gramos de polvo se necesitaran (100ml x 58gr/1000ml = 5.8gr del polvo del medio Kliger + 100ml de agua destilada).
* Se calienta agua y se disuelve poco a poco.
* Una vez disueltos se tienen que verter en un matraz Erlenmeyer que sea del doble de capacidad.
* Luego lo tapamos con papel de aluminio, y le pondremos la tira del autoclave y lo pondremos en el autoclave.* Lo dejaremos en el autoclave entre 1 hora y media y 2 horas.
* Cuando la temperatura empiece a bajar de 45ºC se empezará a solidificar, por eso lo tenemos que poner en las placas de petri o en los tubos antes de que se enfrie.
* Una vez en las placas y tubos lo dejamos enfriar.
* Al día siguiente empezamos a sembrar.
* 2 tubos de Kliger donde se sembrará E.coli
* Haremos 2tipos de siembra.
* -por picadura
* -por estria por agotamiento horizontal
* Una vez tenemos las bacterias sembradas en los medios, lo dejamos incubando todo 24 horas a 37ºC.
* Esterilización:
El medio de esterilización para este microorganismo será el autoclavado.
Utiliza vapor de agua a 121ºC durante 15 o 20 minutos. Esta temperatura se logra si se obtiene una presión deuna atmósfera relativa (dos atmósferas absolutas), ya que el aumento de la presión provoca aumentos proporcionales en el punto de ebullición del agua. Es el mecanismo de destrucción microbiana más efectivo, y bien utilizado asegura esterilización. El equipo que se utiliza es la autoclave.
* Diagrama de Flujo:
Elegir el Microorganismo a Cultivar (E. Coli)
Elegir el Microorganismo a Cultivar(E. Coli)
Utilizar bata, guantes, cubre bocas y lentes de seguridad, para realizarla.
Utilizar bata, guantes, cubre bocas y lentes de seguridad, para realizarla.
Se calienta agua, se disuelve y se echa a un matraz Erlenmeyer
Se calienta agua, se disuelve y se echa a un matraz Erlenmeyer
Se cubre con papel y se mete a la autoclave. (1 o 2 hrs.)
Se cubre con papel y se mete a la autoclave.(1 o 2 hrs.)
Preparar Medio de Cultivo Elegido (Kliger)
Contiene mucha lactosa y las bacterias se alimentan y la fermentan.
Preparar Medio de Cultivo Elegido (Kliger)
Contiene mucha lactosa y las bacterias se alimentan y la fermentan.
Cuando baje la temperatura se pone en caja petri y se deja enfriar
Cuando baje la temperatura se pone en caja petri y se deja enfriar
Se deja incubadodurante 24horas a 37 grados
Se deja incubado durante 24horas a 37 grados
Se siembra por el método de agotamiento de estria
Se siembra por el método de agotamiento de estria
El medio de cultivo resulto como debía. (Los MC se desarrollaron).
El medio de cultivo resulto como debía. (Los MC se desarrollaron).
El medio de cultivo no dio resultado (No se desarrollaron los MC).
El medio de...
Bacteria: Escherichia coli (Enterobacteria)
* Material y Equipo:
* 1 mechero
* Tela de Asbesto
* 1 agitador
* 1 magneto
* 1 matraz de 500 ml
* 1 balanza
* 1 espátula
* 1 probeta de 250 ml
* 1 caja de Petri estériles desechables
* Masking tape
* Papel aluminio
* Reactivos para el medio de cultivo(Kliger)
* Extracto de carne
* Extracto de levadura
* Peptonas
* Lactosa
* Destroza
* Cloruro Sódico
* Citrato amónico y Fe2
* Rojo fenol
* Agar
* Autoclave
* Formulación del medio de cultivo:
-Kliger: su composición es: extracto de carne (3gr/l), extracto de levadura (3gr/l), peptonas (20gr/l), lactosa (10 gr/l), destroza (1gr/l),cloruro sódico (5gr/l), citrato amónico y Fe2+ (0.50gr/l), rojo fenol (0.03gr/l) y agar (15gr/l).
Para elaborarlo primero suspendemos 58gr del polvo en 1l de agua destilada y lo llevamos a ebullición. Los esterilizamos al autoclave durante 15 minutos a 121ºC. Luego lo dejamos enfriar.
* Procedimiento:
* Primero se prepara el medio de cultivo (Formulación) a utilizar.
* Después secalcula cuantos gramos de polvo se necesitaran (100ml x 58gr/1000ml = 5.8gr del polvo del medio Kliger + 100ml de agua destilada).
* Se calienta agua y se disuelve poco a poco.
* Una vez disueltos se tienen que verter en un matraz Erlenmeyer que sea del doble de capacidad.
* Luego lo tapamos con papel de aluminio, y le pondremos la tira del autoclave y lo pondremos en el autoclave.* Lo dejaremos en el autoclave entre 1 hora y media y 2 horas.
* Cuando la temperatura empiece a bajar de 45ºC se empezará a solidificar, por eso lo tenemos que poner en las placas de petri o en los tubos antes de que se enfrie.
* Una vez en las placas y tubos lo dejamos enfriar.
* Al día siguiente empezamos a sembrar.
* 2 tubos de Kliger donde se sembrará E.coli
* Haremos 2tipos de siembra.
* -por picadura
* -por estria por agotamiento horizontal
* Una vez tenemos las bacterias sembradas en los medios, lo dejamos incubando todo 24 horas a 37ºC.
* Esterilización:
El medio de esterilización para este microorganismo será el autoclavado.
Utiliza vapor de agua a 121ºC durante 15 o 20 minutos. Esta temperatura se logra si se obtiene una presión deuna atmósfera relativa (dos atmósferas absolutas), ya que el aumento de la presión provoca aumentos proporcionales en el punto de ebullición del agua. Es el mecanismo de destrucción microbiana más efectivo, y bien utilizado asegura esterilización. El equipo que se utiliza es la autoclave.
* Diagrama de Flujo:
Elegir el Microorganismo a Cultivar (E. Coli)
Elegir el Microorganismo a Cultivar(E. Coli)
Utilizar bata, guantes, cubre bocas y lentes de seguridad, para realizarla.
Utilizar bata, guantes, cubre bocas y lentes de seguridad, para realizarla.
Se calienta agua, se disuelve y se echa a un matraz Erlenmeyer
Se calienta agua, se disuelve y se echa a un matraz Erlenmeyer
Se cubre con papel y se mete a la autoclave. (1 o 2 hrs.)
Se cubre con papel y se mete a la autoclave.(1 o 2 hrs.)
Preparar Medio de Cultivo Elegido (Kliger)
Contiene mucha lactosa y las bacterias se alimentan y la fermentan.
Preparar Medio de Cultivo Elegido (Kliger)
Contiene mucha lactosa y las bacterias se alimentan y la fermentan.
Cuando baje la temperatura se pone en caja petri y se deja enfriar
Cuando baje la temperatura se pone en caja petri y se deja enfriar
Se deja incubadodurante 24horas a 37 grados
Se deja incubado durante 24horas a 37 grados
Se siembra por el método de agotamiento de estria
Se siembra por el método de agotamiento de estria
El medio de cultivo resulto como debía. (Los MC se desarrollaron).
El medio de cultivo resulto como debía. (Los MC se desarrollaron).
El medio de cultivo no dio resultado (No se desarrollaron los MC).
El medio de...
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