Saponinas

 Determinación de Saponinas en Vegetales y Alimentos (Fenwick y Oakenfull, 1983)
Las saponinas se pueden encontrar en una gran variedad de plantas incluyendo la alfalfa, soya y semillas deleguminosas, habiéndose demostrado un efecto negativo sobre el crecimiento de monogástricos. Es un antinutriente estable al calor.
Reactivos
* Acetona G.R.
* Metanol
*Solución n-butanol-metanol-amoníaco concentrado (3.5:1:2.5)
* Solución estándar de saponina purificada en metanol
* Solución de ácido sulfúrico en metanol (100 ml por litro)
Materiales y equipo
* Extractor soxhlet* Rotoevaporador
* Densitómetro con graficador
* Planímetro
* Desecador
* Placa de gel de sílica para cromatografía (Kieselgel 60 F-254 Merck)
Procedimiento
Muela finamente lamuestra y séquela a peso constante. Pese alrededor de 40 g y colóquela a reflujo con acetona en el extractor soxhlet por al menos 24 horas para remover lípidos, pigmentos, etc. Cambie el solvente pormetanol y continúe la extracción por al menos otras 24 horas. Deje enfriar el extracto metanólico y llévelo a 250 ml con metanol.
En este punto hay una modificación al método propuesta por Miriam Monforte(CICY, Mérida, Yucatán, México). En lugar de llevarlo a 250 ml como sugiere el método original, es más recomendable concentrar la muestra, lo que permite cuantificar cantidades muy pequeñas desaponina, para lo cual, pase el extracto metanólico a un rotoevaporador y concentre a sequedad. Resuspenda el residuo con un mínimo de metanol y páselo a un vial previamente pesado; si no se va a usar deinmediato, seque con nitrógeno y guárdelo en desecador. Pese el vial con la muestra seca y calcule el peso del residuo. Para utilizar la muestra, resuspenda con una cantidad conocida de metanol(alrededor de 1 ml).
Cromatografía cualitativa en capa fina
Coloque puntos del extracto sobre una placa de gel de sílica y revélelos con una solución n-butanol-etanol-amoníaco concentrado (3.5:1:2.5)....