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DETERMINACIÓN DE γ-GLUTAMIL TRANSFERASA EN SUERO
MÉTODO CINÉTICO COLORIMÉTRICO

La γ-glutamil transferasa (γ-GT o GGT) es una enzima de membrana ampliamente distribuida en el organismo. Se localiza principalmente en riñón, vesículas seminales, páncreas, hígado, bazo y cerebro. Su actividad es influenciada por cualquier factor que afecte a las membranas celulares de los órganos quela contienen.
En las células del conducto biliar abunda y en la membrana plasmática donde, si bien su función no está totalmente clara, participa en el transporte de aminoácidos, transfiriendo γ–glutamilo desde el glutatión hasta el aminoácido.
Aumenta en suero, sobre todo, debido a alteraciones biliares y hepáticas. Es un gran marcador de colestasis, más sensible que la fosfatasa alcalina, yse eleva de forma temprana hasta 30 veces por encima de su valor de referencia.

El alcohol también tiene un efecto en la GGT, y las concentraciones altas podrían indicar alcoholismo, en particular alcoholismo crónico. Como resultado de la susceptibilidad a la inducción de enzimas las determinaciones de GGT se deben hacer tomando en cuenta las consideraciones a efectos posteriores de fármacos.Se emplea como marcador de cumplimiento en la retirada del consumo de alcohol ya que los valores disminuyen a la mitad en unas 2 semanas y vuelven al intervalo de referencia en 6 – 8 semanas. También se eleva en otras enfermedades, como la diabetes mellitus, el infarto de miocardio o la pancreatitis.
El análisis conjunto de γ-GT, fosfatasa alcalina, transaminasas y bilirrubina, amplíasignificativamente el panorama del diagnóstico diferencial de las enfermedades hepáticas primarias y secundarias, formando parte del hepatograma.




FUNDAMENTO DEL METODO

L - γ -glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + glicilglicina -------- L- γ -glutamilglicilglicina + 5-amino-2-nitrobenzoato

MUESTRA
Suero o plasma
CONDICIONES DEL PACIENTE
En ayunas
Procedimiento



Muestra 2
Rvo500 ul
2 ml
Mx
50 ul
200 ul


1. Cargamos el Rvo. en un tubo de ensayo, y pre incubamos por 30 segundos, inmediatamente después echamos la Mx.
2. Luego leer en el fotocolorímetro ( forma directa)
3. En la forma manual igual cargamos el reactivo, preincubamos por 30 s y echamos inmediatamente después la Mx, luego leemos, y volvemos a incubar por 1 min aproximadamente y volvemos a leer, asísucesivamente por 3 min o 3 lecturas.
4. Incubación a 37°C
5. Factor =1111 u/l


MÉTODO AUTOMATIZADO – HERA
GGT
1. Forma Directa

Resultado = 21.77 U/L

2. Forma Manual








1. Calculamos el U/L . Nuestro factor fue 111 U/L

ABSORVANCIAS
Diferencia
1.165
1.214-1.165=0.049
1.238-1.214=0.024
1.269-1.238=0.031
1.214

1.238

1.269









DETERMINACIÓNDE LACTATO DESHIDROGENASA
MÉTODO CINETICO UV
Lactato deshidrogenasa (LDH o LD) es una enzima, con una estructura de tetrámero formado por dos tipos de subunidades H y M, que cataliza la interconversión de ácido láctico y pirúvico, se encuentra distribuida de manera extensa en el cuerpo. Las actividades altas se encuentran en el corazón, hígado, músculo esquelético, riñón y eritrocitos;cantidades menores se encuentran en los pulmones, músculo liso y cerebro.
Presentan 5 isoenzimas que se enumeran por su velocidad de migración electroforética: LD-1, LD-2, LD-3, LD-4 Y LD-5.
La LDH se encuentra en el citoplasma de todas las células del organismo con una actividad 500 veces superior a la del plasma, por lo que una pequeña lesión incrementa su concentración sérica, lo cual indica unanecrosis celular.
Debido a su amplia distribución celular, su elevación es inespecífica y ocurre en lesiones cardiacas, hepáticas, musculares, renales, etc.
Los trastornos hepáticos, como la hepatitis viral y la cirrosis, muestran incrementos de 2 a 3 veces el límite superior normal. En el infarto agudo al miocardio y el infarto pulmonar también muestran aumentos de casi el mismo grado. En el...