Staphylococcus aureus

INGENIERÍA BIOQUÍMICA

“Shigella y Staphylococcus”
CATEDRÁTICO Q.F. P. Aura Flores Pérez

Alumnos:

Shigella
TAXONOMIA:
Dominio: Filo: Clase: Orden: Familia: Género: Bacteria Proteobacteria Gammaproteobacteria Enterobacteriales Enterobacteriaceae Shigella

Está dividido en cuatro subgrupos: Shigella dysenteriae (Subgrupo A), Shigella flexneri (Subgrupo B), Shigella boydii (SubgrupoC) y Shigella sonnei (Subgrupo D). Cada subgrupo, con la excepción de S. sonnei, tiene varios serotipos.

CARACTERISTICAS GENERALES: Gram negativos Inmóviles No esporulados Anaerobios y anaerobios facultativo No fermenta lactosa con excepción de algunas cepas de S.Sonnei. No produce lisina descarboxilasa Ni sulfuro de hidrógeno

EPIDEMIOLOGIA
*Agente etiologico de gastroenteritis (shigelosis). *Se asocia ademas a colitis hemorragica y sindrome hemolitico urèmico. *Invade y se multiplica intracelularmente. *contaminación fecal-oral.
Sitio de invasión: colon.

TOXINAS: Shiga(A-B5) (S. dysenteriae)

Penetran en el tracto intestinal por la boca y llegan al intestino grueso.

Síntomas

(ocasionados por la destrucción del epitelio del

intestino, por la producción de la toxinaShiga.)

En las heces aparecen moco, a veces sangre.

Pueden tomar hasta una semana por lo general duran entre 2 o 4 días en aparecer después de la ingestión.

Alimentos asociados

MEDIOS DE CULTIVO PARA SHIGELLA
A B

C

AGAR SALMONELLA-SHIGELLA (S-S) (A) , AGAR MAC CONKEY (B), AGAR XILOSALISINA-DESOXICOLATO (XLD) (C).

Identificación

PRUEBAS BIOQUIMICAS
AGARTRIPLE-AZUCARHIERRO

AGAR LISINA-HIERRO

Lactosa (-), Glucosa (+), SH2 (-) con o sin gas

LCD (-), SH2 (-)

ROJO DE METILO

MOVILIDAD

INMOVIL

MÒVIL

SHIGELLA: +

SHIGELLA: - (INMÒVIL)

PREVENCION
Buena higiene personal. Uso de agua

tratada

apropiadamente. Las personas que están enfermas deben ser excluidas de las zonas en las que se preparan los alimentos para el consumo.Manipulación y preparación de los alimentos.

Se estudiaron 132 aislamientos de Shigella spp. obtenidos de heces de igual número de pacientes con diarrea. Cada cepa se caracterizó según su serotipo, su resistencia a 13 antibióticos individuales o combinados y su sensibilidad a las piocinas mediante el método de estrías cruzadas.

•Ampicilina (AMP) •Ampicilina con subalctama (AMS) •Cefalotina(CEF) •Gentamicina (GEN) •Neomicina (NEO) •Tetraciclina (TET) •Cloranfenicol (CMP) •Colistina (COL) •Acido nalidixico (NAL) •Ciprofloxacina (CIP) •Furaxodilona (FUR) •Fosfomicina (FOS) •Tripetoprima con sulfametoxazol (TMS)

Las especies de Shigella estudiadas mostraron una elevada resistencia a los antibióticos de uso más frecuente. La aplicación de técnicas de tipificación epidemiológica puedeayudar a conocer con mayor precisión la distribución y evolución de cepas de microorganismos resistentes circulantes.

Metodología. Shigella dysenteriae fue obtenida del instituto nacional de laboratorios INLASA, previamente tipificada por métodos serológicos.

La cepa fue sembrada en agar Mac conkey y Salmonella-shigella incubada a 35 C durante 24 horas.

Posteriormente se sembraron enlos agares: •hierro de kliger, •lisina descarboxilasa, •sulfuro indol mutilidad, •fenilananina y •citrato de Simmons.

Preparación de la muestra. Para la optimización del PCR se hicieron un total de cuatro pruebas. Donde las variaciones a utilizarse, volumen de PBS y velocidad de centrifugación. 1.- PBS con volumen de 300 µl. se centrifugo por dos minutos en una microcentrifuga a 12000rpm.

2.-Se utilizaron volúmenes diferentes de PBS las cuales fueron 300 µl, 200 µl y 100 µl. Velocidad de centrifugación a 14000 rpm
3.- PBS con volumen de 300 µl y la velocidad se disminuyo a 5000 rpm. Cambiando la cantidad de muestra en un tubo se trabajo con 5 colonias, en otro con 10 y el último con una asada abundante. 4.- PBS con volumen de 300 µl a una centrifugación de 5000 rpm y se manejo...