Enzimas de restricci n
restricción
FERNANDEZ,R 104
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Las enzimas de restricción, también conocidas como
endonucleasas, son enzimas que cortan los enlaces fosfodiester
del material genético a partir de unasecuencia que reconocen.
Las mismas permiten cortar DNA de hebra doble, donde
reconocen secuencias palindrómicas (secuencias que se leen
igual en ambas direcciones).
Son extraídas de organismosprocarióticos (bacterias), donde
actúan como un mecanismo de defensa, para degradar material
genético extraño que entre en la célula. Las bacterias tienen la
capacidad de metilar su DNA, lo cualsirve para distinguir entre el
DNA extraño y el DNA propio. Las enzimas de restricción no
pueden cortar DNA metilado, de este modo solo afectan el DNA
extranjero y no el DNA bacterial.
Existen 3 tiposde enzimas de
restricción:
1.
Tipo I y Tipo III:
a.
Tienen actividad de restricción (cortan) y modificación
(metilan).
b.
Cortan a cierta distancia de la secuencia de
reconocimiento, lasTipo I cortan lejos de la secuencia de
reconocimiento, ya sea río arriba o río abajo. Las Tipo III cortan
de 5-8 bases antes o despúes de la secuencia que reconocen.
c.
Necesitan ATP para moverse através de la molécula de
DNA, desde el lugar de reconocimiento hasta el sitio del corte
2.
Tipo II:
a.
b.
Cortan de manera consistente y predecible dentro de la
secuencia que reconocen.
c.
Sólo requieren Mg++ como cofactor.
d.
No necesitan ATP.
Sólo tienen actividad de restricción.
Las endonucleasas se nombran a partir de las bacterias de las que
son extraídas, sunombre está dado según el género y la especie
de la bacteria de donde se aisló por primera vez esta enzima. La
primera letra representa el género de la bacteria, las próximas dos
indican la especie, unacuarta letra indica la cepa, y un número al
final indica la cantidad de enzimas que se han aislado de esa cepa.
Ej:
Eco RI à E = género Escherichia
co = especie coli
R = cepa RV 13
I = primera...
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