Actividad Enzimatica De La Catalasa

ACTIVIDAD ENZIMATICA
Objetivo:
Observar el comportamiento de la enzima ante diferentes concentraciones de sustrato.

Introducción:
El estudio de las velocidades de reacción con una enzima y la forma en que cambia en respuesta a cambios en los parámetros experimentales se conoce como cinética enzimática y es uno de los métodos más antiguos para conocer el mecanismo enzimático.
La velocidadde una reacción bioquímica se define como el cambio de la concentración de un reactante o producto por unidad de tiempo. El estudio cuantitativo de la catálisis enzimática, se denomina cinética enzimática porque proporciona información sobre las velocidades de reacción. Los estudios cinéticos miden también la afinidad de las enzimas por los sustratos y los inhibidores, y proporciona informaciónsobre los mecanismos de reacción. La cinética enzimática tiene varias aplicaciones prácticas, que incluyen una mejor comprensión de las fuerzas que regulan las rutas metabólicas y el diseño de tratamientos adecuados.
Lo primero que se observo del comportamiento de las enzimas, fue el efecto poco común de la concentración de sustrato sobre la velocidad de reacción enzimática.
Para estudiar lasvelocidades de reacción se mezclan la enzima y el sustrato en una solución adecuada amortiguadora a una temperatura fija.
Uno de los factores clave que afecta a la velocidad de una reacción catalizada por una enzima es la cantidad de sustrato presente. Pero el estudio de los efectos de la concentración de sustrato es complicado debido al hecho de que la concentración de sustrato cambia durante eltranscurso de una reacción a medida que el sustrato se convierte en producto. Una aproximación consiste en medir la velocidad inicial cuando la concentración de sustrato es generalmente mucho mayor que la concentración de enzima. En estas circunstancias, si el tiempo es suficientemente corto después del inicio de la reacción, los cambios en la concentración de sustrato son insignificantes por loque se puede considerar que la concentración de sustrato es constante complejo enzima sustrato constituye la clave para comprender el comportamiento cinético.
En una reacción catalizada por una enzima, el enzima existe en dos formas, la forma libre o sin combinar enzima y la forma combinada enzima- sustrato. A baja concentración de sustrato, la mayor parte de la enzima estará en la forma sincombinar enzima. Aquí la velocidad será proporcional a la concentración de sustrato.
La máxima velocidad inicial de la reacción catalizada se observa cuando todo el enzima este virtualmente como complejo ES y la concentración de enzima sea extremadamente pequeña. En estas condiciones el enzima esta saturado con su sustrato de modo que el aumento adicional de concentración de sustrato no tiene efectosobre la velocidad. Esta condición se produce cuando la concentración de sustrato es suficientemente alta, de modo que todo el enzima libre se convierte en la forma Es. Cuando el complejo ES se descompone dando el producto, el enzima queda libre para catalizar otra reacción, el efecto de saturación es una característica distintiva de la catálisis enzimatica.
Con concentraciones relativamentebajas de sustrato, la velocidad inicial de la reacción aumenta conforme se añade mas sustrato; pero con concentraciones mas altas, el aumento en la velocidad es cada vez mas lento hasta el punto en que la velocidad se hace constante sin importar cuanto sustrato este presente, al graficar la curva tiene forma de una hipérbola. La velocidad constante se define como la velocidad máxima.
Estecomportamiento catalítico lo observamos en la mayoría de las enzimas, se puede describir como un efecto de saturación de sustrato. Los investigadores que analizaron y explicaron la forma de esta curva de velocidad fueron los bioquimicos Leonor Michaelis y Maud Menten. En 1913 propusieron una teoriza general de la acción enzimatica y desarrollaron una ecuación matemática para expresar la forma hiperbólica...