Automatizacion del hemograma

Automatización del Hemograma

Material recopilado por

Carbia C Fink N Lazarowski A

INTRODUCCION La automatización proporciona mayor exactitud y precisión que los métodos manuales. Durante los últimos 20 años la automatización reemplazó casi en su totalidad el recuento manual, con la posible excepción del recuento de plaquetas con contraste de fase como un procedimiento confirmador.Numerosos fabricantes de instrumentos desarrollaron y comercializaron analizadores hemáticos. En los casos típicos, estos analizadores proporcionan en menos de un minutos, los ocho parámetros hemáticos estándar del hemograma completo [HC], más un recuento diferencial de leucocitos de tres componentes (o cinco componentes en equipos más modernos), en 100 microlitos de sangre entera. Por esto, laautomatización permite el manejo más eficiente de mayor volumen de trabajo (n° de muestras), así como el diagnóstico y el tratamiento más oportuno de la enfermedad. Principios generales del equipamiento A pesar de la cantidad de analizadores hemáticos disponibles de fabricantes diferentes y con los distintos grados de sofisticación y complejidad, para el funcionamiento se utilizan sobre todo dosprincipios básicos: la impedancia electrónica (resistencia) y la dispersión óptica. La impedancia electrónica, o la resistencia a la corriente continua (CC) de bajo voltaje fue desarrollada por Wallace Coulter en la década de 1950 y es la metodología utilizada con mayor frecuencia. La radiofrencuencia (RF), o la resistencia a la corriente electromagnética de alto voltaje a veces se utiliza junto con laimpedancia electrónica de la CC. La marca Technicon Instruments introdujo el barrido óptico con campo oscuro en la década de 1960 y Ortho Diagnostics Systems siguió con un instrumento óptico basado en láser en la década de 1970. En el equipamiento hemático actual con frecuencia se emplea la dispersión óptica, que utiliza luz láser y no láser. Impedancia electrónica El principio de la impedancia en elrecuento de células se basa en la detección y la medición de cambios en la resistencia eléctrica producida por las células cuando atraviesan una apertura pequeña. Las células suspendidas en un diluyente conductor de la electricidad, como solución fisiológica, se arrastran a través de una apertura (orificio) en un tubo de vidrio. En la cámara de recuento, o ensamblaje del transductor, se aplica lacorriente eléctrica de baja frecuencia entre un electrodo externo (suspendido en la dilución celular) y uno interno (alojado dentro del tubo de apertura). La resistencia eléctrica entre los dos electrodos, o la impedancia en la corriente, se produce a medida que las células atraviesan la aper-

tura, que tiene sensores y produce pulsos de voltaje medibles (fig. 1). En algunos instrumentos, laspantallas del osciloscopio muestran los pulsos que generan las células cuando éstas interrumpen la corriente.

Figura 1. Principio Coulter para el recuento celular El número de pulsos es proporcional al número de células contadas. El tamaño del pulso de voltaje es directamente proporcional al tamaño (volumen) de la célula, lo que permite la discriminación y el conteo de células de tamañoespecífico mediante el uso de circuitos umbral. Los pulsos se reúnen y ordenan (canalizan) según su amplitud mediante analizadores de la altura de los pulsos. Los datos se trazan en un gráfico de distribución de frecuencia, o histograma de distribución de tamaño, con el número relativo en el eje Y y el tamaño (número del canal equivalente al tamaño específico) en el eje X. El histograma producidorepresenta la distribución del volumen de las células contadas. En la figura 2 se ilustra la construcción de un gráfico de distribución de frecuencia. Los umbrales de tamaño separan las poblaciones celulares en el histograma, y el recuento corresponde a las células cuantificadas entre los umbrales fijos, inferior y superior, para cada población. Los histogramas de distribución por tamaño pueden...