Citogenetica laboratorio

Universidad Nacional Autónoma de Honduras
Facultad de Ciencias
Departamento de Biología
Laboratorio de Genética Médica
(BI-134)
Instructora Sharon Bendeck
Integrantes:
Nelcy Carolina Villeda 20062001750 # 21
Maricruz Díaz 20070003558 # 22
Bárbara Elisa Ávila 20081002593 # 23
Sección: 802
Ciudad Universitaria Tegucigalpa, 5 de marzo de 2011

Objetivos
1. Comprender los procesosdel ciclo celular con sus respectivas bases
2. Reconocer cada una de las fases de la mitosis
3. Reconocer el cuerpo de Barr en células de la mucosa bucal
4. Comprender la importancia de la cromatina sexual en aquellos síndromes que cursan de diferenciación sexual

Introducción
CITOGENÉTICA CLÁSICA Y CITOGENÉTICA MOLECULAR
PROF. T.M. CIT. FAVIÁN TREULEN
¿QUE ES LA CITOGENÉTICA?Disciplina que tiene por objeto estudiar alteraciones numéricas y estructurales que pueden producirse en los cromosomas.
Estas alteraciones pueden ser congénitas o adquiridas.
Pueden producirse en todas las células del organismo o solo en algunas.
La citogénetica se remonta al año 1956 cuando Tijo y Levan describen el número de 46 cromosomas.
En 1959 Lejeune describe a la trisomía 21.
En 1971Caspersson describe el primer método de bandeo cromosómico, el bandeo Q.
El bandeo Q y otras técnicas de bandeo (GTG, CBG) descritas posteriormente han facilitado la identificación de cada uno de los cromosomas.
Actualmente existe el ISCN 1995.
Cromosomas 1 – 22 X e Y.
Grupos A(1-3), B(4-5), C(6-12,X), D(13-15), E(16-18),
F(19-20), G(21-22,Y)
Brazos largos y cortos.
¿QUE ES UN CARIOTIPO?El conjunto de cromosomas de una célula se denomina cariotipo.
Se mantiene inalterable en todas las células de un individuo asi como en los individuos de una misma especie.
A veces se producen alteraciones que son estudiadas con técnicas de citogenética clásica.
¿CÓMO OBTENEMOS UN CARIOTIPO?
CICLO CELULAR
La transición desde interfase a división celular (mitosis) y volver a interfase.
Sereconocen 4 fases en el ciclo celular: G1 (gap one); S(síntesis); G2(gap two); M(mitosis).
MITOSIS
En la fase S cada cromosoma se replica y la célula llega ser 4n. Durante la mitosis cada una de las dos copias se deriva a cada una de las células hijas. La mitosis puede dividirse en cuatro etapas: profase, metafase, anafase, telofase. En metafase los cromosomas se encuentran en su máximacompactación.
 CULTIVO CELULAR
El análisis citogenético se puede realizar en células de diferentes tejidos como, linfocitos de sangre periférica, fibroblastos, amniocitos, trofoblastos, células tumorales y germinales. -Por la facilidad de la obtención de la muestra, los exámenes de rutina se realizan en linfocitos de sangre periférica. -Dependiendo del diagnóstico existen variaciones a la técnica standard. Incubar la muestra en un medio de cultivo líquido adecuado (RPMI 1640).
Una vez alcanzado el crecimiento adecuado se detiene el ciclo celular en metafase (colcemid).
Se realiza la cosecha de las mitosis.
Se gotea la solución en un portaobjeto limpio y los cromosomas fijados al vidrio se someten luego a técnicas de tinción y bandeo.
BANDEO CROMOSÓMICO
Se someten los cromosomas a diferentesagentes denaturantes del DNA (calor, tripsina, soluciones alcalinas). -El bandeo GTG (tripsina) se usa de rutina y se complementa con otros bandeos (CBG o RBG)
 ANÁLISIS MICROSCÓPICO
Se realiza en un mínimo de 35 mitosis bandeadas, más una fotografía y el montaje del cariotipo completo de cada una de ellas. - Este recuento debe ser aumentado a 50 o 100 mitosis en presencia de dos o más lineascelulares y en X frágil.
DESCRIPCIÓN DEL CARIOTIPO
La descripción del cariotipo normal o con alteraciones como traslocaciones, deleciones, inversiones, rearreglos estructurales complejos, fragilidades, duplicaciones, se realiza con la nomenclatura indicada por el ISCN (1995)
CITOGENETICA MOLECULAR
Las limitaciones de la citogenética clásica y de la genética molecular por si solas, han sido...