Citogenetica

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Informe de genética:

Resumen:

Un cromosoma es la estructura des empaquetamiento del ADN con proteínas previo a la división celular para su segregación posterior a sus células hijas.

Introducción:

EL DNA de los organismos eucariontes, se encuentra asociado a proteínas histónicas para formar la fibra de cromatina, la cual se pliega a sí misma para formar los cromosomas. Loscromosomas son estructuras complejas, ubicadas en el núcleo de la célula, compuesto por cromatina. La cromatina es el conjunto del ADN 35%, contiene un 35% de histonas, un 20% de otras proteínas no histónicas y ARN 10%.

La mejor etapa para obtener cromosomas es en Metafase; (donde en la división celular los cromosomas están en mayor condensación y se observa mejor su forma y morfología particular).Para obtener cromosomas se necesitan utilizar 2 técnicas fundamentales:
Fijación y la hipotonía.

Fijación: es donde se pretende preservar el material que va a ser utilizado, manteniendo la estructura cromosómica intacta, evitando degradación.

Hipotonía: las células se ponen en contacto con un medio hipotónico de manera que entra el agua y las células se hinchan y posteriormente se rompala membrana celular y se obtenga los cromosomas.

La Citogenética es el estudio que se encarga de comprender, estructura, composición, morfología, y bandeo. Y es muy importante para la construcción de cariotipos.

Se llama cariotipo al número, forma y tamaño de los cromosomas de la Célula, pueden ser observados a microscopio óptico. Los cromosomas se ordenan de mayor a menor tamaño y porla ubicación del centrómero, todo esto se llama ideograma.

Objetivos:
- conocer la técnica que permite obtener cromosomas de medula ósea del ratón.
- observar los diferentes tipos de morfología cromosoma
- confeccionar un cariotipo.
- familiarizarte con el recuento de cromosomas y reconocer variaciones numéricas
- Analizar las variaciones cromosómicas de especies evolutivamenterelacionadas.

Procedimiento experimental

Para el práctico, se dispuso de una rata de laboratorio (Marmosa elegans) a la cual se le suministro una inyección con 2 mg/K de peso corporal de Colchicina vía interperitoneal dos horas antes de sedarla con éter. Luego, se procedió a extraer el fémur de una de las patas traseras del ratón, la cual se limpio con cuidado y se cortaron las epífisis. Luego, setomo el fémur con una mano y con la otra se procedió a extraer las células de la medula pinchando por arriba del hueso con una jeringa de 1 mL que contenía 3 mL de KCl (solución hipotónica) al 0,075 M, quedando las células en un tubo. Esta extracción se dejo en hipotonía durante 20 minutos a temperatura ambiente, y luego se completo el volumen del tubo hasta 8 mL con KCl y se llevo a centrifugara 1200 rpm por 5 minutos. Paralelamente, se observo al microscopio una preparación de cromosomas humanos, de la cual se tomo una fotografía. Luego de los 5 minutos, se obtuvo un pellet en el fondo del tubo mas sobrenadante, el cual se extrajo un poco, se agrego 6 mL de fijador frío (metanol y acido acético) por las paredes del tubo utilizando una pipeta, se dejo en hielo por 20 minutos y se llevoa centrifugar nuevamente por 5 minutos. Se obtuvo un nuevo pellet, se le extrajo parte del volumen del sobrenadante, se le agrego 10 mL de fijador frío con un pipeta y se llevo a centrifugar de nuevo a 1200 rpm por 5 minutos. Finalmente, al pellet obtenido se le volvió a extraer parte del volumen del sobrenadante y se agregaron 0,2 mL de fijador frío, y con un gotero se dejo caer una gota desdealtura a un portaobjetos frío. Se dejo secar la preparación y a continuación se tiño la preparación en Giemsa al 9% en Buffer Sörensen por 10 minutos, luego se lavo en Buffer la preparación, se dejo secar, se observo al microscopio y se tomo una fotografía de la preparación además de contar en numero de cromosomas.
Posteriormente te observo al microscopio una preparación de células HeLa y se...
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