Determinación de azucares reductores por el método DNS
Páginas: 20 (4851 palabras)
Publicado: 28 de abril de 2013
Práctica 1.
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 g tartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2 g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.000
0.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Preparar cada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar a ebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de hielo 15 minutos.
Leer a 540 nm yrealizar la curva de absorbancia vs. concentración.
Nota:
Se debe de hacer una curva de calibración para cada ensayo.
Para muestras con altas concentraciones de azucares la relación entre absorbancia y concentración no es consistente por lo que se deben de hacer diluciones.
Práctica 1.
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 gtartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2 g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.000
0.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6 g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Prepararcada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar a ebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de hielo 15 minutos.
Leer a 540 nm y realizar la curva de absorbancia vs. concentración.
Nota:
Se debe de hacer una curva de calibración para cada ensayo.Para muestras con altas concentraciones de azucares la relación entre absorbancia y concentración no es consistente por lo que se deben de hacer diluciones.
Práctica 1.
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 g tartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.000
0.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6 g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Preparar cada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar aebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de hielo 15 minutos.
Leer a 540 nm y realizar la curva de absorbancia vs. concentración.
Nota:
Se debe de hacer una curva de calibración para cada ensayo.
Para muestras con altas concentraciones de azucares la relación entre absorbancia y concentración no es consistente por loque se deben de hacer diluciones.Práctica 1.
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 g tartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2 g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.0000.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6 g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Preparar cada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar a ebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de...
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 g tartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2 g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.000
0.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Preparar cada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar a ebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de hielo 15 minutos.
Leer a 540 nm yrealizar la curva de absorbancia vs. concentración.
Nota:
Se debe de hacer una curva de calibración para cada ensayo.
Para muestras con altas concentraciones de azucares la relación entre absorbancia y concentración no es consistente por lo que se deben de hacer diluciones.
Práctica 1.
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 gtartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2 g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.000
0.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6 g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Prepararcada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar a ebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de hielo 15 minutos.
Leer a 540 nm y realizar la curva de absorbancia vs. concentración.
Nota:
Se debe de hacer una curva de calibración para cada ensayo.Para muestras con altas concentraciones de azucares la relación entre absorbancia y concentración no es consistente por lo que se deben de hacer diluciones.
Práctica 1.
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 g tartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.000
0.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6 g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Preparar cada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar aebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de hielo 15 minutos.
Leer a 540 nm y realizar la curva de absorbancia vs. concentración.
Nota:
Se debe de hacer una curva de calibración para cada ensayo.
Para muestras con altas concentraciones de azucares la relación entre absorbancia y concentración no es consistente por loque se deben de hacer diluciones.Práctica 1.
Determinación de azucares reductores por el método DNS
Reactivos:
Reactivo DNS (1.6 g NaOH + 30 g tartrato de sodio y potasio más 1 g de acido 3,5-dinitrosalicilico + 100 mL de agua destila).
Solución patrón de glucosa 2 g/L.
Procedimiento:
Preparación de curva patrón:
Concentración
Solución patrón mL
Agua destilada mL
Blanco
0.0000.500
0.3 g/L
0.075
0.425
0.6 g/L
0.150
0.350
0.9 g/L
0.225
0.275
1.2 g/L
0.300
0.200
1.6 g/L
0.400
0.100
2.0 g/L
0.500
0.000
Preparar cada tubo con 0.5 mL de muestra problema.
Adicionar 0.5 mL de reactivo DNS.
Agitar los tubos para homogenizar.
Llevar a ebullición durante 5 minutos.
Agregar a cada tubo 5 mL de agua destilada, agitar para homegenizar.
Dejar en baño de...
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