Determinación de azúcares reductores.


Determinación de azúcares reductores.
Método de Somogyi-Nelson.





Grupo 3 de Biología -Fecha 11/10/2014




PRÁCTICA Nº1: DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES. MÉTODO DESOMOGY-NELSON
Introducción:
En el medio existen los llamados azúcares reductores ya que contienen grupos que son fácilmente oxidables. En cambio los azúcares que contiene un grupo reductor tienen laposibilidad de ser oxidados por agentes oxidantes suaves como los iones férrico o cúprico.
En esta primera práctica para lograr la determinación de azúcares reductores seguimos el método colorimétrico deSomogy-Nelson. Con este método determinamos cuantitativamente los azúcares reductores capaces de reducir el ion cúprico a ion cuproso.
La determinación de estos azúcares lo lleva a cabo unespectrofotómetro, que transmite luz a través de una solución y así determinar la concentración de un soluto en dicha disolución.
Objetivos.
El objetivo principal de esta práctica es la determinación de azúcaresreductores en las muestras problema.
Materiales.
-12 tubos de tapa roscada.
-2 pipetas.
-Puntas de pipetas.
-Incubadora de agua caliente.
-Agitador.
-Frasco lavador con agua destilada.-Espectrofotómetro.
-Vasos de ensayo.
Métodos.
Para la realización de esta práctica contamos con una serie de reactivos:
Reactivo número 1: El primer reactivo contamos con la presencia de Somogyi I yreactivo de Somogyi II, al mezclar ambos reactivos lo hacemos en una determinada proporción, que en este caso es la proporción 4:1 (v/v) (26 ml de Somogyi I y 4 ml de Somogyi II) ; de esta maneraobtenemos el reactivo número 1.
Reactivo número 2: reactivo de Nelson.




Para llevar a cabo esta práctica hemos de mezclar en tubos 2 ml de muestra problema con 2 ml del reactivo número 1 (mezcla deSomogyi I y Somogyi II) a continuación dichos tubos se tapan y se agitan, seguidamente se colocan en la incubadora de agua hirviendo durante 15 minutos.
Pasados los 15 minutos los tubos se enfrían...