Diagnostico de virus humanos

PRACTICA #3 DIAGNOSTICO DE VIRUS HUMANOS.
OBJETIVO DE LA PRACTICA Que el alumno conozca teóricamente los principales métodos de diagnóstico de virus humanos. INTRODUCCION. Los virus son organismos tan pequeños, que su tamaño les permite pasar a través de los filtros que retienen bacterias. Las características básicas para identificar a un virus son: la composición del ácido nucleico, ladisposición de la cápside, la presencia o ausencia de una envoltura, el tamaño del virus y el huésped. MUESTRAS PARA DIAGNOSTICO: Las muestras deben tomarse precozmente en la fase aguda de la infección. Deben transladarse al laboratorio a la mayor brevedad posible, en medio de transporte. Las muestras más comunes son: - Torundas nasofaríngeas: adecuados para el diagnóstico de enterovirus, adenovirus, yherpes simplex. Las nasofaringeas se prefieren para el virus respiratorio sincicial y la mayoria de los otros respiratorios. Las nasales son las mejores para los rinovirus. - Aspirados faríngeos: son mejores que los hisopos (torundas) nasofaringeos, pero estos últimos son mas prácticos. - Torundas rectales y muestras de heces: Aquí se muestran virus no cultivables como rotavirus, o adenovirus, quese detectan por microscopía electrónica o con técnicas de detección de antígenos. - Secreciones, Sangre o Líquido cefalorraquídeo. - En algunas virosis excepcionalmente el diagnóstico solo puede efectuarse en Biopsia de cerebro, como en la encefalitis por herpes simplex; en Huéspedes inmunodeprimidos y con citomegalovirus, el virus solo puede identificarse en el órgano afectado. DIAGNOSTICO VIRAL1. Métodos para detectar virus. 1.1. Observación del efecto citopático, en cultivo de tejidos inoculados con ciertos virus.

La etiología de un determinado síndrome viral puede demostrarse recuperando el agente causal en tejidos celulares de diversos tipos (por ej: riñón de mono, pulmón humano fetal, amnios humano o células tumorales humanas). Los huevos embrionados actualmente solo se utilizanpara cultivar el virus cuando se desea preparar vacunas. El empleo de animales de experimentación es excepcional en el diagnóstico. - Las células primarias de riñón de mono son excelentes para cultivar mixovirus, paramixovirus y muchos enterovirus; también para algunos adenovirus. - Las células diploides fetales humanas son células fibroblásticas en las que crece un amplio espectro de virus, comoel de herpes simple, varicela zoster, adenovirus, picornavirus, y sólo en éstas pueden cultivarse los citomegalovirus. - Las células HEP-2 son epiteliales provenientes de un cancer humano, útiles para recuperar el virus respiratorio sincitial, adenovirus, y herpes simple. - Células mononucleares normales normales humanas de sangre periférica, que no suelen estar disponibles, permiten el cultivodel virus ( SIDA ) de la inmunodeficiencia, el coxsackie A y los togavirus. El crecimiento de un virus se detecta mediante la observación de cambios en la monocapa del cultivo celular, denominado efecto citopático (ECP). Cuando aparecen cambios en la morfología celular, lisis celular, vacuolización, formación de cincicios y existen cuerpos de inclusión, se produce un efecto citopáticocaracterístico. Los cuerpos de inclusión son cambios histológicos que se producen en las células por los componentes virales o por variaciones en las estructuras celulares. Un técnico experto puede distinguir los efectos citopáticos característicos de las principales familias de virus. Según el cultivo celular en el que aparece el ECP y el tipo de crecimiento viral, se puede realizar un diagnóstico de presunciónde un gran número de virus de importancia clínica. Algunos virus no producen rápidamente ECP en las líneas celulares que se suelen utilizar en los laboratorios de virología clínica. No obstante se pueden determinar por otras técnicas, como la interferencia en la replicación de otros virus (por ej los picornavirus no pueden replicarse en células previamente infectados con el virus de la...