Estudiante

I. INTRODUCCIÓN 11
A. Biología Molecular 12
1. Concepto 12
B. DNA 12
1. Aislamiento del DNA 14
2. Estructura ypropiedades del DNA 15
3. Genes 17

II. TÉCNICAS ELEMENTALES 20
A. DNA Recombinante 20
1. Enzimas de Restricción 20
B. DNAComplementario (Sonda) 24
C. Identificación de Secuencias Específicas 25
D. Desnaturalización y Renaturalización del DNA 26
E. Agentes Desnaturalizantes 261. Desnaturalización y Renaturalización por Efecto de la Temperatura 26
2. Desnaturalización por Ácidos y Bases 27
3. Desnaturalización por Agentes químicos 27
F. Métodos de Ensayode Hibridación 28
1. Hibridación en Fase Liquida 28
2. Hibridación en Soporte Sólido 28
3. Hibridación Dot Blot y Slot Blot 30
4. Hibridación de Southern(DNA) 31
5. Hibridación Northern (DNA, RNA). 31
6. Hibridación In Situ 31
7. Hibridación in Situ Tisular 32
8. Hibridación In SituCromosómica 32
9. Técnicas Relacionadas 32
a. Transferencia Western 33

III. PREPARACIÓN Y MARCAJE DE SONDAS 35
A. Preparación de Sondas Genéticas 37
1.Clasificación de las Sondas 37
a. Sondas Convencionales 37
b. Sondas de DNA obtenidas por clonación celular (DNA recombinante). 37
c.Sondas de DNA obtenidas por clonación acelular
(Amplificación por PCR) 38
d. Sondas sintéticas 38
e. Síntesis química de oligonucleótidos 38
B.Marcaje de Sondas 39
1. Marcaje directo en la molécula de sonda 41
2. Marcaje con DNA polimerasa 41
a. Método de traslado de la mella. 41...