GIP Variants

Amino acid variants in tha human glucose-dependent
insulinotropic polypeptide (GIP) receptor
The impact on the pancreatic ß cell response and functional expression

 

INTRODUCCIÓN

 SUJETOS, MATERIALES Y MÉTODOS

 

RESULTADOS

 

DISCUSIÓN

 

CONCLUSIONES

INTRODUCCIÓN
INCRETINAS

 

Determinar la organización exon-intron del
receptor GIP humano

 Variabilidad genética del receptor GIP afecta la
respuesta de las células ß pancreáticas

 

Receptores GIP alterados exhiben
modificaciones en la respuesta a la producción
de cAMPSUJETOS, MATERIALES Y
MÉTODOS
SUJETOS
RECEPTOR GIP
ALTERACIONES EN LA ESTRUCTURA DE GIP

 

MATERIALES
Y MÉTODOS

Organización Exon-Intron en
receptor GIP humano

 

Análisis de laconformación del
polimorfismo de cadena sencilla

 

Ensayos de detección de
mutaciones identificadas en
receptor GIP

 

Ensayos para medición de
variables en sangre

 

Construcciónde receptor GIP

 

Análisis de cAMP

 

Análisis de acoplamiento

MATERIALES Y MÉTODOS
Organización Exon-Intron en
receptor GIP humano
•  Expand High Fidelity PCR System
•  Taqpolimerasa

Análisis de la conformación del
polimorfismo de cadena sencilla
•  100 ng DNA genómico- 25µl

MATERIALES Y MÉTODOS
Ensayos de detección de mutaciones
identificadas en receptor GIP
• A207V (GcGGTG) 268 bp
•  E354Q (GAGCAG) 217 bp

Ensayos para medición de variables en
sangre
•  Glucosa, Insulina y Péptido C
•  GIP  Detección Radioinmunológica

MATERIALES Y MÉTODOSConstrucción de receptor GIP
•  Sitio de mutagénesis
•  Vector pcDNA-3

Análisis de cAMP
•  Las células fueron lisadas y el AMPc intracelular
fragmentado con tripsina se separó en Sephadex
ycolumnas de alúmina.

Análisis de acoplamientos
•  No aumento la concentración competitiva de GIP
no radioactivo

SEPHADEX
Gel Dextrano utilizado para
filtración y cromatografías

RESULTADOS...