Informe de laboratorio enzimas

Universidad Católica De La Santísima Concepción Facultad De Medicina Departamento CS. Básicas y Morfología Biología Celular

Enzimas:
“Efecto de la concentración de sustrato y de enzimas en lavelocidad de reacción”

Alumnos: Nicole Sanhueza. Fernando Santana. Felipe Valdebenito. Makarena Valenzuela. Pablo Valladares.

Profesor: Ricardo Palma

PAUTA INFORME DE LABORATORIO ENZIMAS(BIOLOGIA CELULAR) 1.- Influencia de la concentración de sustrato sobre la velocidad de reacción. a) Anote los datos en la siguiente tabla.

Tubo Nº 1 2 3 4 5

[s] (mM) 4 3 2 1 0.5

Absorbancia 0.9680.830 0.703 0.470 0.288

Velocidad (µmol PO4H- /10 min) 2.8 2.4 2.1 1.4 0.8

1/[S] 0.25 0.33 0.50 1.00 2.00

1/Vi 0.36 0.42 0.48 0.53 1.25

b) Grafique la curva de saturación (velocidad v/sConcentración sustrato) y estime los parámetros cinéticos (Vmax y Km)

Sustrato 4 3 2 1 0,5

Velocidad 2,8 2,4 2,1 1,4 0,8

= Km = Velocidad máxima

Velocidad máxima. De acuerdo a los datosobtenidos y haciendo una proyección de los futuros datos que se podrían obtener se ha estimado que la velocidad máxima tiene un valor de 3 µmol PO4H- /10 min. Km. La Km corresponde a la concentración desustrato a la que se obtiene la mitad de la velocidad máxima, para este caso la velocidad máxima es 3 µmol PO4H- /10 min, entonces la mitad de la velocidad máxima es 1.5 µmol PO4H- /10 y por lo tantonuestra Km es aproximadamente 1,4

c) Grafique los doble recíprocos y determine parámetros cinéticos (Vmax y Km)

1/[S] 0,25 0,33 0,5 1 2

1/Vi 0,36 0,41 0,48 0,53 1,25

Mediante regresiónlineal se obtuvieron los siguientes datos: El valor de R para el grafico es 0.999987 El lugar de intercepto con el eje y es 0.24 por lo tanto la velocidad máxima es 1/0.24 = 4.2 La pendiente es 0.5 ,esta se define como pendiente = Km/Vmax, por lo tanto 0.5 = x/4.2, lo que da X con un valor Km de 2.1

2.- Influencia de la concentración de la enzima sobre la velocidad enzimática. a) Anote sus...