Medio ambiente

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MATERIALES NECESARIOS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS CON EL METODO DE FILTRACION POR MEMBRANA

Agar LES Endo

❖ Extracto de levadura 1,2 g
❖ Tripticasa (casitona) 3,7 g
❖ Tiopeptona 3,7 g
❖ Triptosa 7,5 g
❖ Lactosa 9,4 g
❖ Fosfato dibásico de potasio (K2HPO4) 3,3 g
❖ Fosfato monobásico de potasio (KH2 PO4) 1,0 g
❖ Cloruro de sodio (NaCl) 3,7 g❖ Desoxicolato de sodio 0,1 g
❖ Lauril sulfato de sodio (NaC12 H25 SO4) 0,05 g
❖ Fucsina básica 0,8 g
❖ Agar 15,0 g
❖ Agua para llevar a 1 000 mL.

Disolver los componentes en agua conteniendo 20 mL de etanol 95 % (v/v). Calentar a ebullición, enfriar y distribuir en volúmenes convenientes en cajas de Petri. No colocar en autoclave, almacenar el medio a 4°C en la oscuridad ydesechar el medio que no se haya usado después de 2 semanas.

Medio mFC

❖ Triptosa 10,0 g
❖ Peptona proteosa No. 3 o polipeptona 5,0 g
❖ Extracto de levadura 3,0 g
❖ Cloruro de sodio (NaCl) 5,0 g
❖ Lactosa 12,5 g
❖ Sales biliares No. 3 ó mezcla de sales biliares 1,5 g
❖ Azul anilina 0,1 g
❖ Agua para llevar a 1000 Ml

Rehidratar en agua conteniendo 10 mLde ácido rosólico (aurina) (C19H14O3) al 1 % en NaOH 0,2 N. Calentar el medio hasta su punto de ebullición, quitar inmediatamente del calor enfriar y distribuir en volúmenes convenientes en cajas de Petri. No esterilizar en autoclave. El pH final debe ser 7.4
El medio debe almacenarse entre 2°C y 10°C y cualquier porción no utilizada debe desecharse después de 96 h.

Este medio puedesolidificarse mediante la adición de 1,2 % al 5 % de agar (m/m) antes de la ebullición.

El reactivo de ácido rosólico (C19H14O3) se descompondrá si se esteriliza en autoclave. La solución patrón debe almacenarse en la oscuridad entre 2°C y 10°C y debe desecharse después de 2 semanas, o antes si su color cambia de rojo oscuro o café oscuro.

MEDIOS SELECTIVOS:

Agar McConkey

❖ DigeridoPancreático de Gelatina 17.0 g
❖ Sales Biliares 1.5 g
❖ Digerido Péptico de Tejido Animal 1.5 g
❖ Cloruro de Sodio 5.0 g
❖ Digerido Pancreático de Caseína 1.5 g
❖ Cristal Violeta 0.001g
❖ Lactosa 10.0 Agar Bacteriológico 13.5 g
❖ Rojo Neutro 0.03 pH 7.1 ± 0.2
Suspender 50g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitación suave hasta su completadisolución y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C (15 libras de presión) durante 15 minutos. Enfriar a una temperatura entre 45-50°C y vaciar en placas de Petri estériles.

Médio EMB:

KF-Streptococcus

❖ Peptona Proteosa 10 g
❖ Extracto de Levadura 10 g
❖ Cloruro de Sódio 5 g
❖ Glicerofosfato de Sódio 10 g
❖ Maltosa 20 g
❖ Lactosa 1 g
❖ Azida deSódio 0.4 g
❖ Púrpura de Bromo Cresol 0.015 g
❖ Agar 20 g
❖ pH final: 7.2 ± 0.2 a 25 °C.

Suspender 76.4 g en 1 litro de agua destilada o desmineralizada fría y calentar
a ebullición hasta completa disolución, continuar calentando por 5 minutos más.
Distribuir en cantidades de 100 mL o como se desee en matraces. No esterilizar en autoclave. Recalentar bajará el pH y el medioserá menos productivo.
Enfriar a 50 °C y añadir 1 mL de una solución de TTC al 1% (Cloruro de Trifeniltetrazolium al 1%) por cada 100 mL de medio estéril. Mezclar para obtener una distribución uniforme del TTC en el medio.

Sulfito-Polimixina-Sulfadiazina (SPS)
❖ Triptona 15 g
❖ Extracto de Levadura 10 g
❖ Citrato Férrico 0.5 g
❖ Sulfito de Sodio 0.5 g
❖ Tioglicolato deSodio 0.1 g
❖ Monooleato Sorbitán 0.05 g
❖ Sulfadiazina 0.12 g
❖ Sulfato de Polimixina B 0.01 g
❖ Agar 15 g
❖ pH final: 7.0 ± 0.2 a 25 °C.

Suspender 41 g en 1 litro de agua destilada o desmineralizada, calentar a ebullición para disolver completamente, distribuir en tubos ó en cajas según se requiera, esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 libras de presión...
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