Medios de cultivo de bacterias
Preparación y colonias de bacterias
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Tipos de medios
Los medios de cultivo se dividen acorde a sus características en generales, selectivos odiferenciales. Generales: permiten el crecimiento de cualquier tipo de bacteria. Selectivos: sólo permiten crecer un cierto tipo, p.ej. sólo un género. Diferenciales: permiten distinguir entre dos o masbacterias por características coloniales.
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Medios generales
• Agar Soya Tripticasa (TSA)* • Agar marino 2216 o Zobell • Agar Nutritivo**
* añadir 2.0 % NaCl ** añadir 2.5 % NaCl2-sep-05
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Medios selectivos
• Agar Tiosulfato, Citrato, Sales de bilis, Sacarosa (TCBS): Vibrio • Agar Cetrimida: Pseudomonas
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Medios diferenciales
• Agar Eosina Azul deMetileno: coliformes y E. coli
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Preparación de medios
• Siempre preparar los medios con agua destilada (salvo el Marino). • Es necesario ajustar simpre el pH. • Todos los utensiliosdeben estar perfectamente limpios. • Todos los medios deben esterilizarse de alguna forma.
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• Los medios se preparan en matraces cónicos con tapa • Se pesa la cantidad de mediorequerida, se disuelve o suspende en el agua. • Se ajusta el pH. • Se esteriliza a 121°C por 20 min • Se espera a que enfrie (42°C o hasta que se pueda sostener el recipiente sin quemarse la mano) •Servir 20 ml Aprox. en cada caja de Petri
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Esterilización
Es el proceso mediante el cual se destruyen o remueven todos los microrganismos
• Tipos de esterilización– Húmeda, autoclave – Seca, horno – Gaseosa: óxido – Filtración:
etileno, formaldehído o H2O2.
membranas de 0.45 y 0.22 µm.
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Esterilización húmeda
• No colocar recipientescompletamente cerrados en la autoclave. • El vapor debe entrar en contacto con todo lo que se quiere esterilizar • No esterilizar solventes o químicos corrosivos • Si se esterilizan líquidos, bajar...
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