Medios de cultivo

Medios de cultivo en tubo
* Los medios de cultivo en tubo pueden tener distintas presentaciones, cada uno con su forma de inoculación:
* Caldo. (CN)
* Medio Semisólido. (OF)
* Medio sólido.
* Completamente inclinado. (AN)
* Inclinado y con fondo. (TSI)
Prueba de la Catalasa.
* Medio de Cultivo: Agar Nutritivo.
* Principio: Determinar lapresencia de la enzima catalasa.
* Utilidad: Ayuda a diferenciar Streptococcus (-) de Micrococcus (+) y Staphylococcus (+); y Bacillus de Clostridium.
* Reactivo: El reactivo empleado en ésta prueba es H2O2 al 30%.
* Incubación: 24h a 35-37ºC.
* Resultados: Positivo: Formación inmediata de Burbujas. Negativo: Sin formación de burbujas.
* Bases Bioquímicas: Ésta enzima se encuentraen la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas. El H2O2 es un producto terminal de la descomposición aeróbica de los azucares. Dicho compuesto es altamente tóxico y puede provocar la muerte del microorganismo. La catalasa tiene la capacidad de descomponer el H2O2. No realizar ésta prueba en Agar Sangre.
Prueba de la Oxidasa.
* Medio de cultivo:Agar Nutritivo.
*Principio: Determinar la presencia de las enzima oxidasa.
* Utilidad: Sirve para diferenciar las familias Pseudomonadaceae (+) de Enterobacteriaceae (-).
* Incubación: 24h a 35-37ºC.
* Resultados: Deben leerse en los primeros 60 seg. Positivo: Colonias de color azul o morado Negativo: Ausencia de color azul.
* Bases Bioquímicas: Ésta enzima se encarga de oxidar el citocromo reducido,utilizando oxígeno molecular.Los colorantes utilizados para la prueba de la oxidasa son aceptores y donadores artificiales de electrones. Éstos colorantes son rápidamente oxidados al entrar en contacto con las enzima oxidasa.
* Reactivo: Tetrametilparafenilendiamina
Prueba de Oxidación-Fermentación
* Medio de Cultivo:Juego de Medio OF (1 tubo con aceite mineral, otro sin aceite).
*Principio: Determinar el tipo de metabolismo (fermentativo u oxidativo) de un carbohidrato- glucosa.
* Utilidad: Diferenciar géneros no entéricos, de las enterobacterias
* Incubación: 48h a 37ºC.
* Resultados:OF-Fermentativo: Ambos tubos viran a amarillo completamente. OF-Oxidativo: Solo el tubo sin aceite vira a amarillo, y solo en la parte superior. OF-Inerte: No viran ambos tubos.Bases Bioquímicas: Algunas bacterias solamente metabolizan azucares en condiciones aeróbicas (Aerobias), mientras que otras lo hacen aeróbica y anaeróbicamente (Anaerobias facultativas). La mayoría de las bacterias de importancia clínica son anaerobios facultativos. Para ésta prueba es necesario un indicador del pH, ya que detectaremos la acidez producida. Indicador del pH: Azul de Bromotimol.Ácido: amarillo. 7.1: Verde. Alcalino: Azul.
Pruebas del TSI.
* Medio de cultivo: Agar Hierro Triple Azúcar o TSI (Triple Sugar Iron).
* Principio:Determinar la capacidad de un organismo de atacar a más de un carbohidrato, con o sin producción de gases y una posible producción de H2S.
* Utilidad: Ayuda a diferenciar grupos, género y especies bacterianas,sobre todo Enterobacterias.
* Incubación: A 37ºC, por no más de 24h.
* Resultados: (Fermentación: ácidos y gases, H2S
* Bases Bioquímicas: Como sabemos, un microorganismo puede tener la capacidad de utilizar diversos sustratos en el medio. El TSI contiene Glucosa al 0.1%, Lactosa al 1% y Sacarosa al 1%. Algunos microorganismos tienen la capacidad de fermentar más de uno de loscarbohidratos presentes en el medio, otros solo uno, pero algunos otros ninguno de ellos. Durante el proceso de fermentación, se puede producir o no CO2 y H2.
* Podemos observar 3 tipos de fermentación:
* Fermentación de la Glucosa. Cuando un organismo solamente fermenta la glucosa, se obtiene una superficie alcalina y un fondo ácido.La superficie alcalina nos indica que la glucosa se ha...