Microbiana

Morfología Microscópica de Bacterias
Características tintoriales

Características Tintoriales
• Colorante: Son compuestos orgánicos, aromáticos y coloreados, con un anillo arilo conteniendo sistemas de electrones deslocalizados y grupos reactivos capaces de darle color y de fijarse a los sustratos para colorearlos.

Colorantes
• Los colorantes constan de: • • • 1) Un anillo aromático(benceno) 2) Un grupo cromóforo 3) Un grupo auxócromo

Colorantes
• Anillo aromático (benceno)
Es un sistema cerrado de dobles enlaces conjugados

Colorantes
• Grupos Cromóforos
Estos grupos imparten al compuesto la propiedad de color.

Configuraciones usuales de cromóforos -C=C-C=N-C=O- N = N - (Azo) - NO2 (Nitro) Anillos Quinoideos - N = O (nitroso) Azoxi Azina -N = (Indámico)Tiocarbonil Tiazina

Colorantes
• Cromógenos Es la unión de un anillo aromático con un grupo cromóforo

Colorantes
• Grupos Auxócromos
Son grupos que incrementan el color uniéndose a una molécula ionizable, reteniendo su capacidad de ionizarse para fijar el colorante a un sustrato

Grupos auxócromo usuales - NH2 - COOH - HSO3 - OH

Efecto de un auxócromo
1-naftol incoloro.
ionizable.naftaleno, incoloro.
Si en lugar del OH se añade un grupo NO2,tenemos el 2,4-dinitronaftaleno amarillo pálido. Si en lugar de un OH o un NO2, se une un OH y un NO2, se tiene el colorante amarillo Martius muy intenso.

Alteración del color por modificadores

Pararosanilina rosa

Violeta de metilo

Cristal violeta

Verde de metilo

Colorantes
• Usos
a) Hacer visibles a losmicroorganismos b) Estudiar estructuras y detalles finos c) Revelar la distribución y naturaleza química de los constituyentes celulares d) Para establecer diferencias entre los microorganismos e) Distinguir entre microorganismos vivos y muertos f) Es adicionado a algunos medios de cultivo como agente selectivo g) Se utilizan como agentes bactericidas o bacteriostáticos i) Alimentos

Colorantes
•Clasificación: a) En función de su origen - Naturales - Artificiales

b) En función de su carga - Ácidos: carga negativa, tiñen estructuras básicas (carga +) - Básicos: carga positiva, tiñen estructuras ácidas (carga -) - Neutros: Sales de un colorante ácido y otro básico, algunos son liposolubles (tiñen inclusiones citoplásmicas lipídicas)

Fucsina

Verde de Malaquita

Naranja de AcridinaÁcido Pícrico

Azul de Metileno Cristal Violeta

Dimetil - Safranina

Trimetil - Safranina

Tinciones
• Definición de mordente: Sustancia química sin poder colorante, pero actúa como sustancia puente entre el colorante y la estructura a teñir, permitiendo su coloración. En otros, altera su estructura celular, permitiendo su tinción • ácido fénico, ácido tánico y lugol

Tinciones
•Preparado para una tinción
a) Extensión o frotis (frote) Consiste en hacer una fina capa de microorganismos, extendiéndolos con el asa bacteriológica sobre un portaobjetos b) Fijación: Se realiza con la finalidad de desnaturalizar o coagular las proteínas del microorganismo, para que éste quede adherido al cristal del portaobjeto y mueran. - Calor, Formaldehído, Metanol, Tetraóxido de osmioTinciones
• Tipos de tinciones: 1) Tinción simple 2) Tinción combinada o compleja 3) Tinción diferencial 4) Tinción selectiva 5) Tinción negativa 6) Tinción vital

Tinciones
• 1) Tinción simple Tinción en la cual interviene un solo colorante. Se pueden determinar características de los microorganismos tales como: forma, agrupación, tamaño y presencia de esporas por contraste.

Tinciones
2)Tinción combinada o compleja En este tipo de tinción intervienen dos o más colorantes
Pej. Tinción de Gram, Tinción de Ziehl-Neelsen Tinción de Shaeffer y Fulton.

Tinciones
• 3)Tinción diferencial Con este tipo de tinción los microorganismos pueden distinguirse un grupo de otro tomando un color diferente pudiéndose tomar como un criterio de clasificación

Tinciones
4) Tinción selectiva...