Practica de determinacion celular

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PRACTICA XVlll:
DETERMINACION CELULAR EN TUBO
METODICA
Fundamento
Los hematíes problema contienen las sustancias antigénicas del sistema ABO y se enfrentan a sueros conocidos que poseenanticuerpos frente a esos antígenos.
El resultado final es la presencia o no de aglutinación en los hematíes reaccionantes.
Material necesario:
° Tubos de centrifuga
° Rotulador de vidrio
° Pipetaspasteur
° Centrifuga
° Gradillas

Reactivos
° Suero anti-A
° Suero anti-B
° Solución salina fisiológica
Muestra
° Sangre total anticoagulada. Para esta técnica es preferible usar unasuspensión de los hematíes problema.
Técnica
1. En primer lugar realizamos el lavado de los hematíes problema. Para ellos rotularlos convenientemente unn tubo de centrifuga y añadimos 1 ml de la muestra desangre. Completamos el tubo con solución salina y agitamos para suspender los hematíes. Centrifugamos 4 minutos a 2000 r.p.m y decantamos el sobrenadante.

2. A los hematíes del tubo les añadimosuna cantidad suficiente de solución salina como para obtener una suspensión al 2%. Esto es aproximado aunque debemos establecer los limites entre 2 y el 4%













3. Rotular trestubos de ensayo bien limpios con letras A, B y D
4. Añadir a cada tubo una gota de la suspensión de hematíes al 2%
5. Añadir dos gotas de suero anti-A en el tubo A, dos gotas de anti-B en el tubo-B.6. Centrifugamos todos los tubos durante 1 minuto a 1.000 r.p.m o 30 segundos a 3.400 r.p.m (centrifuga de inmunohematologia)

Lectura de resultados
Después de centrifugar, golpeamos suavemente elfondo de cada tubo para desprender el sedimento y observar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación.
Reacción negativa: Los hematíes se resuspenderan homogéneamente
Reacciónpositiva: Se observa un botón de hematíes que permanecen unidos una vez desprendido el sedimento.

INTERPRETACION CLINICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS
Se realiza igual que en la técnica en porta.
Es...
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