Quimica

LABORATORIO DE CALIDAD NUTRICIONAL VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS: CASO LOWRY
MÓNICA PIZARRO S.

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• Es un consorcio de instituciones que aspira reducir la desnutrición y mejorar la seguridad alimentaria nutricional en América Latina y el Caribe. • AgroSalud trabaja en la investigación de cultivos biofortificados (Maíz, Fríjol, Arróz y Camote). • En este momento AgroSalud esta en ellanzamiento del primer laboratorio en Sur América, especializado en medir la absorción de hierro, zinc, proteína, y vitamina A, a través de métodos in vitro en alimentos mejorados genéticamente.

• OBJETIVOS • TÉCNICA ANALÍTICA • VALIDACIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO • ANÁLISIS Y RESULTADOS • CONCLUSIONES

OBJETIVOS
Validar un método analítico para determinar el contenido de proteína soluble, el cuales un indicador del grado de biodisponibilidad. Cuantificar la cantidad de proteína soluble que se encuentra en muestras de fríjol y maíz. Alcanzar uno de las primeras metas necesarias para poder cumplir con las BPL.

TÉCNICA ANALÍTICA
R

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

VALIDACIÓN DEL MÉTODO ANALITICO
VALIDAR
Es verificar documentalmente que un método cumple con los requisitosestablecidos.

PARÁMETROS DE VALIDACIÓN
* Linealidad * Precisión * Exactitud * Selectividad * Robustez * Sensibilidad

PARAMETROS APLICADOS
SENSIBILIDAD LINEALIDAD

EXACTITUD

PRECISIÓN

LINEALIDAD

VALIDACIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO

Es la capacidad del método analítico de obtener resultados directamente proporcionales a la concentración del analito dentro de un rango definido.

PRECISIÓNExpresa el grado de dispersión entre una serie de mediciones múltiples de una muestra homogénea bajo condiciones establecidas.

VALIDACIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO
PRECISIÓN PRECISIÓN
Repetitblidad Repetitblidad Precisión Intermedia Precisión Intermedia

Repetibilidad Repetibilidad Instrumental Instrumental

Repetibilidad Repetibilidad del Método del Método

EXACTITUD

VALIDACIÓN DELMÉTODO ANALÍTICO

Expresa la cercanía entre el valor aceptado convencionalmente como valor verdadero y el valor experimental encontrado.

SENSIBILIDAD
La sensibilidad de un método corresponde a la mínima cantidad de analito que puede producir un resultado significativo.

ANALISIS Y RESULTADOS
LINEALIDAD
Se realizó la curva de calibración en el intervalo de 20 a 100 mg/L de proteína. Cadapunto de la curva se realizó por triplicado.
0.7 0.6 Absorbancia 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 0 20 40 60 80 100 120 Concentración de proteína (mg/L) y = 0.0061x + 0.0573 R = 0.9976
2

LINEALIDAD
Test de Cochran, homogeneidad de varianzas Gcalculado =0.5414 ; Gtablas (P = 0.05; K=5; n=3)= 0.6838 Gcalculado< Gtablas , las variancias de las concentraciones son homogéneas, el factor concentración noinfluye en la variabilidad de los resultados. Normalidad de los residuales
Residuales
0.02 0.01 0.00 -0.01 -0.02 0 30 60 90 120

Se observa que la distribución de los residuales, es completamente aleatoria
No se observa ninguna tendencia

Concentración (mg/L)

ANÁLISIS DE VARIANCIA, ANOVA
ANOVA gl Regresión Residual Total 1 3 4 SS 0.146490678 0.000357411 0.146848089 MS 0.1464906780.000119137 F Significance F 1229.60 5.09983E-05

Ho = “El cuadrado medio de la regresion fue igual al cuadrado medio residual” Ha = “El cuadrado medio de la regresion fue diferente al cuadrado medio residual”
Fcalculado = 1229.90 ; Ftablas (P = 0.05) = 5.1E-05 Fcalculado > Ftablas Existe correlación muy significativa entre

xey

TEST DE VERIFICACIÓN DE LA PENDIENTE
Ho = “La pendiente no essignificativamente diferente de cero”. Ha = “La pendiente es significativamente diferente de cero”. tcalculado = 36.22; ttablas (P = 0.05; n = 5) 3.182 tcalculado> ttablas Existe diferencia significativa entre la pendiente y cero.
Intervalo de confianza de la pendiente 0.00623 ± 0.00055 (0.00568; 0.00678) y se observa que este intervalo no incluye el cero.

TEST DE VERIFICACIÓN DE LA VARIABLE...