Tecnicas de clonacion humana

TÉCNICAS DE CLONACIÓN
La clonación consiste en crear individuos iguales genéticamente. Pero no tienen por qué ser iguales fenotípicamente ya que el ambiente influye mucho.
DIVISIÓN ARTIFICIAL DE EMBRIONES
En el estadio de mórula se puede dividir el embrión en 2 embriones.
1-Disociación de blastómeras separar a célula cuando el embrión es joven (2,4 u 8 células).
2-Bisección embrionaria demórula o blastocisto.
DISOCIACIÓN DE BLASTÓMERAS
Podemos separa las células totipotenciales (antes de la activación del genoma) tendremos individuos clónicos.
Primero hay que eliminar la membrana pelúcida.
Después retirar la célula medio en el que no haya ni calcio, ni proteína ni magnesio la célula se separa:
-Embrión de 4 células obtención de 4 individuos.
-Embrión de 8 células lasblastómeras ya tienen una historia el reloj biológico no se reprograma. Los blastocistos que se formen serán pequeños dificulta más la implantación (pero si son totipotenciales).
Si se hace una división del embrión de 8 células, funciona mejor hacer 2 embriones de 4 células o 4 embriones de 2 células.
Para la transferencia de los embriones se vuelve a colocar la zona pelúcida.
Estos embrionesestarían en el oviducto sin zona pelúcida se puede provocar:
*         Gestaciones ectópicas en el oviducto.
*         Respuesta inmunitaria en el oviducto por parte de la madre (no en el útero no haría falta la zona pelúcida).
*         Necesaria para la compactación de la mórula.
Estas zonas pelúcidas vienen de donantes.
Los factores que afectan son:
*        Pérdida dezona pelúcida.
*        Pérdida de contacto entre las blastómeras puede ser perjudicial.
*        Al no reprogramarse tamaño reducido del blastocisto por el bajo número de células.
Actualmente es una forma poco utilizada porque estos embriones se encuentran en el oviducto necesaria la intervención quirúrgica del donante.
BISECCIÓN EMBRIONARIA
Puede se de mórula o blastocisto. En elblastocisto tenemos que cortar por la mitad de la masa celular interna. Cada medio embrión se llama demiembrión o hemiembrión.
Sólo hace falta un medio sin proteína (los embriones se enganchan en el fondo de la placa). Se añade sacarosa para hacer un medio hiperosmótico el embrión pierde agua se colapsa y es más fácil cortar. Se corta con una cuchilla.
Las posibilidades del éxito dependen de:*        Transferencia del embrión entero 60% de gestación.
*        Transferencia de hemiembrión 45-50% de gestación. Pero si se suman los dos, como mínimo conseguiremos un embrión. Por lo tanto, podemos mejorar la tasa de gestación. Además, en la especie bovina, al ser los dos individuos del mismo sexo no hay free-martinismo.
Lo que también se puede hacer es:
-Implantar un embrión.-Congelar el otro embrión para esperar el valor biológico del otro hemiembrión.
Se puede hacer el sexaje con células que quedan libres en el medio a la hora de la bisección sexaje por PCR.
Cuando se congelan los hemiembriones, se disminuye la tasa de gestación al 20%.
Como la mórula y el blastocisto ya están en el útero, no se requiere la zona pelúcida.
Este método es el más usado.TRANSFERENCIA DE NÚCLEOS
Se usa:
-Karyoplast núcleo donante.
-Cytoplast citoplasma receptor.
Se pensaba que sólo se podía hacer:
-Karyoplast debía ser una célula totipotente.
-Cytoplast oocito de metafase II.
Ya se había conseguido en los años ’80.
La obtención del Karyoplast:
-Puede ser sólo un núcleo.
-Toda una célula pero que tenga poco citoplasma.
La enucleación del cytoplast:
ElCytoplast debe tener mucho citoplasma, se suele usar microscopía de fluorescencia para eliminar la placa metafásica para enuclear. Hay especies en las que se ve bien.
Se inyecta el Karyoplast en el espacio perivitelino.
Se produce una descarga eléctrica que provoca fusión de las membranas y activación partenogénica del Cytoplast.
La descarga eléctrica simula la entrada del espermatozoide.
La...