Trigliceridos

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DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL

Marco teórico:

El colesterol es un alcohol esteroide no saturado. Es un importante componente estructural de las membranas celulares y un precursor para la biosíntesis de los ácidos biliares y las hormonas esteroideas. 2/3 del colesterol en plasma están esterificados con cadenas largas saturadas y ácidos grasos no saturados, y 1/3 existe en forma decolesterol no esterificado.

Las concentraciones de colesterol se elevan con la edad desde el principio de la edad adulta en ambos sexos. Las mujeres tienen niveles más bajos que los varones, excepto en la niñez y después de los 50 años.

La ingestión de grasas saturadas y colesterol con la dieta tiene una influencia importante sobre los niveles de colesterol en sangre, tardando los efectos de1 a 2 semanas para ponerse de manifiesto. Para comprobar el nivel habitual de colesterol en una persona es importante que se mantenga con su dieta habitual durante las 2 últimas semanas y que no gane ni pierda peso.

Objetivo: Conocer el fundamento teórico para realizar medición analítica de colesterol total y su correcta interpretación clínica

Condiciones del paciente

No requiere ayunoprevio.

Muestra: Suero o plasma con EDTA, heparina, oxalato o fuoruro.

Estabilidad de la muestra: La muestra es estable 7 días a 2 - 8 ºC.

Método: Enzimático - Colorimétrico.

Fundamento del método: Tanto el colesterol libre como el esterificado presentes en la muestra originan, según las reacciones acopladas descritas a continuación un complejo coloreado que se cuantifica porespectrofotometría.

Colesterol esterificado Col. Esterasa Colesterol + Ac. graso

Col + 1/2 02 Col. Oxidasa Colestenona + H202

2 H202 + 4 aminoantipirina + fenol Peroxidasa Quinonaimina + 4 H20

Procedimiento: Dejar atemperar el reactivo de trabajo durante unos minutos a temperatura ambiente.

Pipetear en tubos de ensayo:Muestra Patrón
|Patrón colesterol | | 10 uL | |
|Muestra | 10 uL | | 10 uL |
|Reactivo de color | 1.0 mL | 1.0 mL |1.0 mL |

▪ Agitar bien e incubar durante 10' a temperatura ambiente o durante 5' a 37ºC.

▪ Leer la Absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de Reactivo a 500 nm.

Cálculo: A muestra x 200 = mg/dL de
A Patrón colesterol

Valores de referencia: Hasta 200 mg/dL. Estos valores se dan a títuloorientativo, es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia.

Las concentraciones de colesterol en sangre se han interpretado clásicamente sobre la base de unos márgenes normales definidos a partir de niveles de colesterol medidos en poblaciones normales. Sin embargo, se ha aceptado desde hace mucho tiempo que el riesgo cardiovascular es una función continua de laconcentración de colesterol y que los individuos situados en el límite superior del margen normal tienen un riesgo mayor que los que están situados en el límite inferior.

Linealidad del método: Hasta 1000 mg/dL.

Interferencias: el ácido ascórbico, la Hemoglobina y la bilirrubina interfieren en el ensayo. Laa lipemia no afecta los resultados.

Para las mediciones de colesterol se aceptaun % de inexactitud + 5% y un CV + 5%, aunque el Laboratory Standardization Panel of the National Cholesteroll Education Program recomienda que tanto la imprecisión como la inexactitud para medir colesterol deben ser reducidas a + 3%.

Los métodos enzimáticos se ven menos sujetos a posibles interferencias por sustancias no esterólicas que los métodos químicos. No obstante, no poseen absoluta...
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