determinación de colesterol GC
Páginas: 12 (2850 palabras)
Publicado: 23 de noviembre de 2013
Laboratorio de análisis instrumentales II
Proyecto final
“Determinación de colesterol en huevo”
Profesora:
M. en C.: Mimí Elizabeth Vargas Quiñones
Equipo 3
Calzada Panti Isis Amairani
Medina Cetina Saúl Ariel
Pacheco Gómez Candelaria Mayanin
Vázquez Pérez Laura
Fecha de entrega
Jueves, 6 de diciembre de 2012
PROYECTO FINAL DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL II
DETERMINACIÓN DECOLESTEROL EN HUEVO
INTRODUCCIÓN
El colesterol es un compuesto químico, un alcohol que pertenece al grupo de los esteroles, con un peso molecular de 386,66 g/mol. Esta molécula se compone de tres regiones: cola de hidrocarburos, un grupo hidroxilo, y 4 anillos de hidrocarburos, como puede observarse en la figura 1
Figura . Molécula del colesterol
Tanto la región del anillo y la regiónde la cola son no polares, lo que significa que se disuelven en grasas, pero no se mezclan con agua. Debido a que es una molécula hidrófoba se disuelve en disolventes orgánicos como el alcohol, el éter, la acetona y el cloroformo. Esto significa que no se pueden disolver en agua ni, por lo tanto, en soluciones acuosas como la sangre. Presenta un punto de ebullición elevado de 360 ºC, un punto defusión de 148 ºC y una densidad de 1,067 g/mL.
El colesterol es una molécula biológica extremadamente importante que tiene papeles importantes en la estructura de la membrana celular, así como también en ser un precursor para la síntesis de las hormonas esteroides y de ácidos biliares. Tanto el colesterol de la dieta como el que se sintetiza de nuevo se transportan en la circulación enpartículas de lipoproteínas.
En los últimos años ha crecido la necesidad por saber la cantidad de colesterol que contienen los alimentos y así prevenir enfermedades cardiovasculares, para ello han surgido diferentes métodos analíticos para el análisis de colesterol.
La cromatografía de gases es una técnica analítica utilizada en la separación, identificación y cuantificación de los componentes de unasustancia o mezcla. Se basa en la diferencia de velocidades de migración de los componentes de una sustancia o mezcla, al ser arrastrados por un gas inerte a través de una columna rellena de un material. Esta técnica puede ser utilizada para la determinación de colesterol en diferentes alimentos, utilizando una columna de carácter poco polar, y un detector FID o un espectrómetro de masas.OBJETIVO
Establecer una técnica por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas para la determinación de colesterol en huevo.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Verificar un método de extracción de colesterol a partir de huevo.
Determinar las condiciones de corrida adecuadas para la determinación de colesterol por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas.
Comprobar losdatos reportados en la bibliografía de la cantidad de colesterol en huevo.
Materiales
Equipos
4 matraces volumétricos de 10 mL
1 matraz volumétrico de 50 mL
2 vasos ppt de 100 mL
2 vasos ppt de 10 mL
1 Vaso ppt de 250 mL
Placa de calentamiento
Termómetro
Micropipeta de 100-1000 μL
Vortex
2 tubos de ensayo con taparrosca
2 pipetas graduadas de 10 mL
Espátula analíticaCromatógrafo de gases con una columna EquityMT5 30m x 0.25mm x 0.25μm, 5% fenil, 95% metilpolisiloxano
Centrifuga
Baño ultrasónico
Reactivos y sustancias
Reactivo de colesterol
KOH 1 M metanolico
Hexano grado HPLC
PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra
1. Pesar 0.5 g de muestra en un tubo de ensayo con taparrosca.
2. Adicionar 14 mL de solución de KOH metanólica 1M
3. Agitar en unvortex, durante 15 segundos
4. Posteriormente sumergir la mitad del tubo en baño maría a 60°C por 15 min, retirando el tubo del baño maría cada 5 min y agitándolo en el vortex por 10 segundos.
5. Dejar enfriar el tubo y una vez frío se adicionar 3 mL de agua y 14 mL de hexano
6. Agitar nuevamente en el vortex y centrifugar la muestra por 1 minuto a 2000 rpm.
7. Tomar la fase de interés
8....
Laboratorio de análisis instrumentales II
Proyecto final
“Determinación de colesterol en huevo”
Profesora:
M. en C.: Mimí Elizabeth Vargas Quiñones
Equipo 3
Calzada Panti Isis Amairani
Medina Cetina Saúl Ariel
Pacheco Gómez Candelaria Mayanin
Vázquez Pérez Laura
Fecha de entrega
Jueves, 6 de diciembre de 2012
PROYECTO FINAL DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL II
DETERMINACIÓN DECOLESTEROL EN HUEVO
INTRODUCCIÓN
El colesterol es un compuesto químico, un alcohol que pertenece al grupo de los esteroles, con un peso molecular de 386,66 g/mol. Esta molécula se compone de tres regiones: cola de hidrocarburos, un grupo hidroxilo, y 4 anillos de hidrocarburos, como puede observarse en la figura 1
Figura . Molécula del colesterol
Tanto la región del anillo y la regiónde la cola son no polares, lo que significa que se disuelven en grasas, pero no se mezclan con agua. Debido a que es una molécula hidrófoba se disuelve en disolventes orgánicos como el alcohol, el éter, la acetona y el cloroformo. Esto significa que no se pueden disolver en agua ni, por lo tanto, en soluciones acuosas como la sangre. Presenta un punto de ebullición elevado de 360 ºC, un punto defusión de 148 ºC y una densidad de 1,067 g/mL.
El colesterol es una molécula biológica extremadamente importante que tiene papeles importantes en la estructura de la membrana celular, así como también en ser un precursor para la síntesis de las hormonas esteroides y de ácidos biliares. Tanto el colesterol de la dieta como el que se sintetiza de nuevo se transportan en la circulación enpartículas de lipoproteínas.
En los últimos años ha crecido la necesidad por saber la cantidad de colesterol que contienen los alimentos y así prevenir enfermedades cardiovasculares, para ello han surgido diferentes métodos analíticos para el análisis de colesterol.
La cromatografía de gases es una técnica analítica utilizada en la separación, identificación y cuantificación de los componentes de unasustancia o mezcla. Se basa en la diferencia de velocidades de migración de los componentes de una sustancia o mezcla, al ser arrastrados por un gas inerte a través de una columna rellena de un material. Esta técnica puede ser utilizada para la determinación de colesterol en diferentes alimentos, utilizando una columna de carácter poco polar, y un detector FID o un espectrómetro de masas.OBJETIVO
Establecer una técnica por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas para la determinación de colesterol en huevo.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Verificar un método de extracción de colesterol a partir de huevo.
Determinar las condiciones de corrida adecuadas para la determinación de colesterol por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas.
Comprobar losdatos reportados en la bibliografía de la cantidad de colesterol en huevo.
Materiales
Equipos
4 matraces volumétricos de 10 mL
1 matraz volumétrico de 50 mL
2 vasos ppt de 100 mL
2 vasos ppt de 10 mL
1 Vaso ppt de 250 mL
Placa de calentamiento
Termómetro
Micropipeta de 100-1000 μL
Vortex
2 tubos de ensayo con taparrosca
2 pipetas graduadas de 10 mL
Espátula analíticaCromatógrafo de gases con una columna EquityMT5 30m x 0.25mm x 0.25μm, 5% fenil, 95% metilpolisiloxano
Centrifuga
Baño ultrasónico
Reactivos y sustancias
Reactivo de colesterol
KOH 1 M metanolico
Hexano grado HPLC
PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra
1. Pesar 0.5 g de muestra en un tubo de ensayo con taparrosca.
2. Adicionar 14 mL de solución de KOH metanólica 1M
3. Agitar en unvortex, durante 15 segundos
4. Posteriormente sumergir la mitad del tubo en baño maría a 60°C por 15 min, retirando el tubo del baño maría cada 5 min y agitándolo en el vortex por 10 segundos.
5. Dejar enfriar el tubo y una vez frío se adicionar 3 mL de agua y 14 mL de hexano
6. Agitar nuevamente en el vortex y centrifugar la muestra por 1 minuto a 2000 rpm.
7. Tomar la fase de interés
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