MANUAL DE PRACTICAS DE BIOQUIMICA TOXICOLOGICA UPN
Páginas: 23 (5667 palabras)
Publicado: 7 de septiembre de 2015
MA
Ç
PRESENTACION
El estudio de la Bioquímica nos brinda conocimientos de los procesos moleculares dentro de la célula. Es por ello, que es un campo muy amplio que posee varias áreas de aplicación en las que se destaca la Bioquímica ambiental, celular, toxicológica, alimentaria y médica. Cada una de estas áreas posee un objeto de estudio específico el cual se relaciona con unconjunto de problemas particulares.
La Toxicológica, por su parte, estudia los efectos tóxicos de los xenobióticos en los organismos. Su campo de acción está dirigido al tema ocupacional, ambiental, ecotoxicológico y alimentario
Por lo tanto, la Bioquímica Toxicológica tiene como objetivo estudiar los procesos bioquímicos o reacciones biológicas que actúan conjuntamente para transformar uncontaminante o xenobiótico, así como el efecto nocivo que puede tener sobre estos organismos.
En el transcurso de las prácticas enfocaremos el estudio no sólo en estos efectos en distintos organismos sino también como se generan e incluso como se puede prevenir la contaminación.
ÍNDICE
Introducción
Contenido Página.
Practica Nº 1: Actividad de la amilasa salival. 04
Practica Nº 2: Denaturaciónde proteínas y actividad enzimática 07
de la catalasa.
Practica Nº 3: recolectar muestras de aguas estancadas
en la ribera del rio Chillon 10
Practica Nº 4: Efecto del cloro en protozoarios. 12
Practica Nº 5: Investigación de sustancias tóxicas. 15
Practica Nº 6: Visita al área de Radiobiología Ambiental del 19
Instituto Peruano de Energía Nuclear.
Practica Nº7: Detección de Salicatos en muestras de orina. 20
Practica Nº 8: Identificación de metales pesados 24
Practica Nº 9: Visita a una planta. 28
Practica Nº 10 y 11: Efecto del sulfato de cobre pentahidratado en
Artemina franciscana. 29
Practica Nº 12 y 13: Ensayo genotóxico sobre peces cebra como 33
Bioindicadores. Parte 2.
Practica Nº 14 y 15: Ensayo de toxicidad aguda con Allium cepamediante la evaluación de la inhibición del crecimiento promedio de raíces de cebolla. 37
Practica N° 1:
ACTIVIDAD DE LA AMISALA SALIVAL.
I. INTRODUCCIÓN.
Las múltiples reacciones bioquímicas se basan en la acción de las enzimas, que en su mayoría son proteínas que tiene un poder catalítico, es decir, el de acelerar una reacción química en la célula.
Un ejemplo de estas enzimas es la Amilasalingual o Amilasa salival, la cual es secretada por las glándulas salivales en la boca y son el inicio de la digestión de los carbohidratos. .
La mayoría de carbohidratos que consumimos se encuentran como polisacáridos (almidón). Es por ello que la Amilasa tiene como trabajo el cortar estas cadenas largas de carbohidratos en disacáridos y monosacáridos los cuales son más fáciles de ser absorbidos porlas células intestinales.
II. OBJETIVOS.
Verificar la acción de la amilasa salival.
Reconocer y diferenciar monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
III. MATERIALES.
Gradillas.
Mecheros de alcohol.
Pinzas para tubos ensayo.
Rejillas.
Trípode.
Tubo de ensayo 15 x 125 mm.
Picetas con agua destilada.
Baguetas.
Goteros de plástico.
Pipetas 10 mL.
Pipetas 5 mL.
Beaker 250 mL.
Propipetas.Espátulas.
Lugol.
Reactivo Benedict.
Ácido nitrico.
Alfa naftol.
Sacarosa.
Glucosa.
Almidón.
IV. PROCEDIMIENTO.
Preparado de saliva: Obtener 2 ml de saliva fresca, se coloca en un vaso precipitado limpio y seco, posteriormente se diluyen 5 veces con agua destilada, se mezclan cuidadosamente.
Acción de la amilasa: En un tubo de ensayo se vierten 5 ml de disolución de almidón y se añaden 1 ml desaliva, se mezcla cuidadosamente y se pone en el baño maría durante 15 min a una temperatura de 37°C. Se hacen repetidamente las pruebas cada 5 minutos con Lugol retirando 1 ml de de solución y agregando el lugol; la ausencia de coloración característica demuestra que la hidrólisis ha finalizado. Guardar el remanente que queda después de la digestión con Amilasa salival.
Presencia de glucosa: La...
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PRESENTACION
El estudio de la Bioquímica nos brinda conocimientos de los procesos moleculares dentro de la célula. Es por ello, que es un campo muy amplio que posee varias áreas de aplicación en las que se destaca la Bioquímica ambiental, celular, toxicológica, alimentaria y médica. Cada una de estas áreas posee un objeto de estudio específico el cual se relaciona con unconjunto de problemas particulares.
La Toxicológica, por su parte, estudia los efectos tóxicos de los xenobióticos en los organismos. Su campo de acción está dirigido al tema ocupacional, ambiental, ecotoxicológico y alimentario
Por lo tanto, la Bioquímica Toxicológica tiene como objetivo estudiar los procesos bioquímicos o reacciones biológicas que actúan conjuntamente para transformar uncontaminante o xenobiótico, así como el efecto nocivo que puede tener sobre estos organismos.
En el transcurso de las prácticas enfocaremos el estudio no sólo en estos efectos en distintos organismos sino también como se generan e incluso como se puede prevenir la contaminación.
ÍNDICE
Introducción
Contenido Página.
Practica Nº 1: Actividad de la amilasa salival. 04
Practica Nº 2: Denaturaciónde proteínas y actividad enzimática 07
de la catalasa.
Practica Nº 3: recolectar muestras de aguas estancadas
en la ribera del rio Chillon 10
Practica Nº 4: Efecto del cloro en protozoarios. 12
Practica Nº 5: Investigación de sustancias tóxicas. 15
Practica Nº 6: Visita al área de Radiobiología Ambiental del 19
Instituto Peruano de Energía Nuclear.
Practica Nº7: Detección de Salicatos en muestras de orina. 20
Practica Nº 8: Identificación de metales pesados 24
Practica Nº 9: Visita a una planta. 28
Practica Nº 10 y 11: Efecto del sulfato de cobre pentahidratado en
Artemina franciscana. 29
Practica Nº 12 y 13: Ensayo genotóxico sobre peces cebra como 33
Bioindicadores. Parte 2.
Practica Nº 14 y 15: Ensayo de toxicidad aguda con Allium cepamediante la evaluación de la inhibición del crecimiento promedio de raíces de cebolla. 37
Practica N° 1:
ACTIVIDAD DE LA AMISALA SALIVAL.
I. INTRODUCCIÓN.
Las múltiples reacciones bioquímicas se basan en la acción de las enzimas, que en su mayoría son proteínas que tiene un poder catalítico, es decir, el de acelerar una reacción química en la célula.
Un ejemplo de estas enzimas es la Amilasalingual o Amilasa salival, la cual es secretada por las glándulas salivales en la boca y son el inicio de la digestión de los carbohidratos. .
La mayoría de carbohidratos que consumimos se encuentran como polisacáridos (almidón). Es por ello que la Amilasa tiene como trabajo el cortar estas cadenas largas de carbohidratos en disacáridos y monosacáridos los cuales son más fáciles de ser absorbidos porlas células intestinales.
II. OBJETIVOS.
Verificar la acción de la amilasa salival.
Reconocer y diferenciar monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
III. MATERIALES.
Gradillas.
Mecheros de alcohol.
Pinzas para tubos ensayo.
Rejillas.
Trípode.
Tubo de ensayo 15 x 125 mm.
Picetas con agua destilada.
Baguetas.
Goteros de plástico.
Pipetas 10 mL.
Pipetas 5 mL.
Beaker 250 mL.
Propipetas.Espátulas.
Lugol.
Reactivo Benedict.
Ácido nitrico.
Alfa naftol.
Sacarosa.
Glucosa.
Almidón.
IV. PROCEDIMIENTO.
Preparado de saliva: Obtener 2 ml de saliva fresca, se coloca en un vaso precipitado limpio y seco, posteriormente se diluyen 5 veces con agua destilada, se mezclan cuidadosamente.
Acción de la amilasa: En un tubo de ensayo se vierten 5 ml de disolución de almidón y se añaden 1 ml desaliva, se mezcla cuidadosamente y se pone en el baño maría durante 15 min a una temperatura de 37°C. Se hacen repetidamente las pruebas cada 5 minutos con Lugol retirando 1 ml de de solución y agregando el lugol; la ausencia de coloración característica demuestra que la hidrólisis ha finalizado. Guardar el remanente que queda después de la digestión con Amilasa salival.
Presencia de glucosa: La...
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