Ambiente

El agar manitol salado es un medio selectivo usado para el aislamiento de estafilococos patógenos, especialmente Staphylococcus aureus, considerado un patógeno bacteriano serio desde que desarrolló resistencia a la penicilina en 1950.1 El agar manitol salado ha sido empleado también en estudios de resistencia a antibióticos, en los
cuales ha demostrado una especificidad de 98,1 % y unasensibilidad de 95,1 % con cepas de
Staphylococcus oxacillina resistentes.2 El agar manitol salado incluye en su composición el indicador de pH: rojo fenol. Este indicador es de color rojo a pH 8,2 y cambia a amarillo a pH por debajo de 6,8. Cuando se desarrollan las colonias de Staphylococcus aureus fermentadoras de manitol, se produce ácido en el medio, el cual reacciona con el indicador y forma las áreasde color amarillo alrededor de las colonias, reacción característica de los estafilococos patógenos.3
Sin embargo, la alta concentración del indicador puede afectar la calidad del medio de cultivo porque la mayoría de estos indicadores son tóxicos para los microorganismos. Además, la cantidad excesiva de indicador sulfoftaleínico (como el rojo fenol) proporciona al medio de cultivo una capacidadde buffer adicional y disminuye la difusión de los ácidos metabólicos. Por otra parte es necesario que el medio de cultivo posea una adecuada composición de bases nutritivas para contrarrestar el efecto inhibitorio de la alta concentración de cloruro de sodio y lograr una rápida y eficiente recuperación de estafilococos.

Manitol Salado Agar.
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizadopara el aislamiento y diferenciación de estafilococos.
Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patogénicos a partir de muestras clínicas, alimentos, productos cosméticos y otros materiales de importancia sanitaria.
También, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halófilas de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados (TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunasespecies pueden no desarrollar.
Fundamento
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentración salina. Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura. Las colonias sospechosas, se repicaránen un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentración) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de laflora acompañante, y el rojo fenol es el indicador de pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y fermentan el manitol, producen ácidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol.
Los estafilococos coagulasa positivafermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o púrpura.

Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
  Extracto de carne | 1.0 | Suspender 111 g de polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar calentando aebullición durante 1 o 2 minutos. Distribuir y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 minutos. |
  Pluripeptona | 10.0 | |
  d-Manitol | 10.0 | |
  Cloruro de sodio | 75.0 | |
  Agar | 15.0 | |
  Rojo de fenol | 0.025 | |
pH final: 7.4 ± 0.2 |
Siembra
Sembrar en superficie un inóculo denso de la muestra.
Incubación
De rutina: durante 18-24 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.
La...