Articulo del herpes

Expression, purification of the UL3 protein of herpes simplex virus type 1, and production of UL3 polyclonal antibody

El herpes simple tipo 1 es un patógeno común que afecta las membranasmucocutaneas y causa infección. La proteína de UL3 pertenece a un grupo del herpes virus tipo1 en proteínas retrasadas. Este estudio fue llevado a cabo para expresar la proteína UL3 y hacer crecer elanticuerpo policlonal. El UL3 fue clonado en la procariótica expresión vectorial Pet 28a (+) para producir Pet 28a (+) UL3. Esta proteína recombinante la His6 tagged UL3 fue expresada en E.coli BL21 yanalizado por SDS PAGE
Como saben el herpes simple tipo 1 causa infecciones en las membranas mucocutaneas, cerebro y órganos internos de recién nacidos infectados. El genoma de HSV1 tiene 152 kb lineardúplex DNA molécula. Es una infección latente que afecta específicamente en el ganglio trigeminal y puede ser reactivada si es estimulada. Existen drogas para su tratamiento que ayudan a detener lossíntomas pero todavía no existe alguna medicina que pueda contra ella. La expresión del gen viral ocurre en forma de cascada primero inmediato temprano, temprano y tarde. Entre los genes que se expresantarde lo está el gen UL3 que codifica para 235 amino ácidos. Estudios confirman que la proteína UL3 es una fosfoproteína nuclear en vez de una glicoproteína. UL3 gen, sus productos se expresan enmúltiples isoformas dos de ellas hacen traducción alternada de ORF (open reading frame) de UL3. Más tarde durante la infección la proteína UL3 se relocaliza en estructuras pequeñas intranucleares conotras proteínas virales.
Los métodos a utilizarse en los estudios realizados sobre este artículo:
a. Construcción de la expresión procariótica de un plásmido para la proteína His6-tagged UL3. El genUL3 fue amplificado usando PCR. El producto del PCR amplificado fue fagocitado por unas enzimas de restricción que fueron EcoRI y Hindill y luego ligadas con el correspondiente vector fagocitado Pet...