Extraccion de adn nuclear a partir de tejido de pie y manto de cittarium pica por precipitacion con cloruro de sodio y determinacion de calidad mediante analisis electroforetico de tipo horizontal

O. Aguilar, D. Polo-Jiménez, E. Ropain.

EXTRACCION DE ADN NUCLEAR A PARTIR DE TEJIDO DE PIE Y MANTO DE
Cittarium pica POR PRECIPITACION CON CLORURO DE SODIO Y DETERMINACION
DE CALIDAD MEDIANTE ANALISIS ELECTROFORETICO DE TIPO HORIZONTAL
NUCLEAR DNA EXTRACTION FROM FOOT AND MANTLE TISSUE OF Cittarium pica
BY PRECIPITATION WITH SODIUM CHLORIDE AND QUALITY DETERMINATION BY
ELECTROPHORETICANALYSIS HORIZONTAL
Aguilar-Ospino Oscar1, Polo-Jiménez Deimer2, Ropain-Hernández Eber3.
1,2,3

Universidad del Magdalena, Facultad de Ciencias Básicas, Programa de Biología.
aguilarospinooscar@hotmail.com, dimrpolo@gmail.com, eberiwel80@hotmail.com

RESUMEN
El objetivo de este análisis de laboratorio fue realizar una extracción de ADN de tejidos del
manto y del pie de la especie Cittariumpica y verificar la calidad del mismo mediante
electroforesis horizontal en gel de agarosa 0.8%, mediante el método de sal común
(cloruro de sodio). El procedimiento consistió en tomar 2 muestras 1,5 mg de tejido del pie
y del manto respectivamente y se rotularon (P1, P2, M1, M2) aplicar el protocolo de sal
común para extracción, suministrado por el docente. La calidad del ADN se verificómediante gel de agarosa al 0.8%, en cámara de electroforesis horizontal a 80V durante 30
minutos sumergida en tampón TAE 1X, con tinción de bromuro de etidio. El resultado
muestra que solo la muestra de manto M1 fue la única con suficiente material genético
como para correr en el gel. Se concluye que debió haber mayor tiempo de incubación
posterior a la añadidura de NaCl [5M].

PALABRAS CLAVE:Método de sal común, Electroforesis horizontal, Gel de agarosa
0.8%, Extracción de ADN, Cittarium pica.

ABSTRACT
The objective of this lab was to conduct a DNA extraction from the mantle tissue of the foot
and the species Cittarium pica and verify its quality by horizontal electrophoresis on 0.8%
agarose gel, by the method of common salt (chloride sodium). The procedure was to take
two 1.5mg samples of tissue of the foot and mantle respectively and labeled (P1, P2, M1,
M2) to implement the protocol for extracting salt, provided by the teacher. DNA quality was
verified by agarose gel 0.8%, in horizontal electrophoresis chamber 80V immersed for 30
minutes in 1X TAE buffer with ethidium bromide staining. The result shows that only the

O. Aguilar, D. Polo-Jiménez, E. Ropain.mantle sample M1 was the only one with enough genetic material to run on the gel. We
conclude that it must have greater incubation time after the addition of NaCl [5M].

KEY WORDS: Salt method, Electrophoresis horizontal 0.8% agarose gel, DNA extraction,
Cittarium pica.
INTRODUCCIÓN
El análisis de la molécula de ADN
constituye una herramienta muy valiosa
que ha permitido delinearestrategias
aplicadas a la investigación básica y al
diagnostico de innumerables entidades
de origen genético, basando esto en el
principio de que la molécula es única en
cada individuo (excepto en gemelos
monocigoticos) y contiene toda la
información necesaria para el desarrollo
y función de los organismos. (Falcon et
al, 2007).
El ADN puede ser extraído de muchos
tipos de materialesbiológicos y el éxito
del análisis molecular depende de su
adecuado aislamiento en términos de
cantidad, calidad y pureza; es necesario
separarlo del resto de componentes
celulares así como del material no
biológico que pueda estar presente.
(Cummings, 1994). Los protocolos de
extracción buscan eliminar o diluir
potentes inhibidores de reacciones de
amplificación que eviten o dificulten
análisisposteriores. (Liu et al, 2004)
El proceso general de aislamiento
involucra tres pasos: primero, la lisis de
las membranas celulares, mediante el
uso de buffer específicos y altas
temperaturas; segundo, la degradación
de las proteínas por incubación con
proteinasa K y/o sales saturadas; tercero,
la extracción del ADN y su precipitación

mediante
el
uso
(Cummings, 1994)

de...