introduccion

METODOLOGIA

PREPARACION DEL TAMPON SALINO-
Se toma un vaso precipitado de 250 ml, se hace una mezcla y se mantiene en la nevera:
200 ml de agua destilada. No usar agua del grifo
2 gramos salde mesa, preferiblemente pura
5 gramos de bicarbonato sódico
Mantener esta preparación en la nevera.

PREPARACION DE LA MUESTRA
En el vaso de la licuadora, triturar los trozos de guisantes ocortar el tejido vegetal con un poco de agua; Accionar 4 veces las cuchillas a impulsos de 15 segundos. Así se romperán muchas células y quedaran expuestas a la acción del detergente.
Agregar a la mezclaobtenida, la preparación del tampón frio y accionar nuevamente la licuadora durante 1 minuto.
En un vaso precipitado de 250 ml, tomar la mezcla y filtrar utilizando la coladera, para obtener ellíquido sobrenadante.
Al filtrado obtenido, se le añade 30 ml de detergente liquido con la pipeta de 10 ml (3 veces), lo mezclamos con la varilla de vidrio evitando ocasionar emulsión (espuma). Dejándoloreposar de 15 a 20 minutos.

OBTENCION DEL ADN-ALCOHOL ISOPROPILICO
En una gradilla se toman 4 tubos de ensayo aplicando en cada tubo 5 ml de la muestra elaborada.
Agregamos 5 ml de alcoholisopropilico enfriado a 0ºC. se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo este inclinado. Dejar actuar el alcohol isopropilico durante unos 20 minutos.
Duranteeste tiempo se forman 3 fases; la primera que es la parte inferior del tubo y corresponde al caldo molecular, la segunda fase en la fase superior y corresponde al alcohol isopropilico y en la tercerafase la unión del caldo molecular y el alcohol donde se formara unas fibrillas de color blancuzco que son fibrillas de DNA.
Se introduce la punta de una varilla hasta justo debajo de la separaciónentre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hasta atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando...