Reconocimiento de biomoleculas

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  • Publicado : 6 de diciembre de 2010
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PRÁCTICA 1. RECONOCIMIENTO DE BIOMOLÉCULAS
 
 
En esta práctica se realizarán reacciones químicas y pruebas características para identificar la presencia de una o varias biomoléculas en una mezcla y  para cuantificar alguna de ellas. Finalmente, se estudiarán algunas actividades enzimáticas.
 
1.- Identificación de glúcidos con poder reductor
           
Todos los monosacáridos y losdisacáridos con enlace monocarbonilo, cuando se encuentran en solución a pH alcalino, tienen la capacidad de reducir otros compuestos. Esta capacidad reside en las características del grupo carbonilo (C anomérico en formas cicladas) libre. Esta propiedad, y por tanto, la presencia de un azúcar reductor, se pone de manifiesto mediante la reacción de FEHLING.
            El reactivo de Fehling consta de:
-Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O
-Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disuletos en agua
 
Fundamento de la reacción: En medio alcalino, el cobre procedente del CuSO4 se encuentra en forma de hidróxido cúprico, y se forma la correspondiente sal Na2SO4. Cuando el   Cu(OH)2 (de color azul) se calienta en presencia de un compuesto reductor se forma óxido cuproso (de color rojo ladrillo).
                   
           
Si hay un compuesto reductor, el Cu cambia su estado de oxidación de (2+ a 1+), lo que se evidencia por el cambio de color.
           
Práctica
 
            Sobre la mesa hay dos soluciones de glúcidos: AZÚCAR DE UVA y AZÚCAR DE REMOLACHA. Hay que determinar si son reductores.
 
Método:
1. Poner en sendos tubos de ensayo 2 mL de la solución de glúcido
2. Añadir a cadatubo 0.5 mL de Fehling A y 0.5 mL de Fehling B.
3. Calentar a la llama.
                        Cuestiones
            1. ¿Cúal o cúales son los azúcares reductores?
            2. ¿Quién se oxida y quién se reduce en la reacción?
            3. ¿Para qué sirven el tartrato Na-K y el calor?
            4. ¿Que resultado daría la reacción de Fehling con glucosa? ¿y con sacarosa?
 
2.-Identificación de polisacáridos: identificación de almidón mediante la prueba del Lugol
 
            En solución acuosa, la amilosa forma estructuras helicoidales lineales y la amilopectina ramificadas, gracias a la formación de puentes de H entre los grupos OH de la glucosa y las moléculas de H2O. Si a una dislución de almidón de le añade I, esta toma un color azul intenso. Esta característica esespecífica del almidón, debido a su estructura, y se debe a la adsorción del I por las cadenas helicoidales, especialmente de la amilosa. Por tanto no es una reacción química, sino una interacción física reversible por métodos físicos. Esto se puede comprobar fácilmente, pues al calentar la mezcla, el color azul desaparece, y al enfriarla vuelve a aparecer.
 
Práctica
            Sobre la mesahay una solución de hervido de patata.
Método:
1. Poner en un tubo de ensayo 2 mL de la solución.
2. Añadir a cada uno de los tubos de ensayo 1 gota de Lugol (solución acuosa de iodo y ioduro potásico). Observar el resultado.
 
Para comprobar que la reacción es específica para almidón, echar 1 gota de Lugol en un trozo de papel de filtro (celulosa), y observar el resultado.
 
Para comprobarque es una interacción física
1. Calentar a la llama el tubo que contiene almidón (teñido de azul con I), hasta que desaparezca el color azul.
2. Enfriar en el grifo y observar la aparición de nuevo de color azul.
                        Cuestiones
            1. ¿El almidón daría positiva la reacción de Fehling?
            2. ¿La celulosa da positiva la prueba del  Lugol?
3. ¿El azul queaparece tras calentar y enfriar es igual de intenso? ¿Por qué?
 
  3.- Identificación de lípidos. Reacción de saponificación.
           
La presencia de un lípido se puede detectar fácilmente por su insolubilidad en agua. Además, se puede detectar si un lípido es saponificable, mediante la reacción de saponificación, o formación de jabón.
            Los ésteres de ácidos grasos...
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