Elisa directo e indirecto

Páginas: 4 (752 palabras) Publicado: 28 de octubre de 2010
2. Explique la Tecnica de(Enzyme-Linked Inmuno Sorbent Assay) ELISA directo y mencione sus aplicaciones en medicina.
Introducción:
La técnica de ELISA es básicamente una prueba empleada para ladetección de antígenos. Este método de inmunoensayo tiene un enorme marco de aplicaciones en los campos de detección de antígenos mediante productos de anticuerpos, esto sumando a que es relativamentesimple de hacer, es versátil, eficaz y económico lo convierte en una gran arma de uso para la ciencia y la medicina.
Puede ser usado en diagnóstico clínico, detección viral, clasificación deanticuerpos en isotipos, búsqueda de anticuerpos monoclonales, etc…
Pasos generales para Prueba ELISA:

1. Tapizado del pocillo con el antígeno o anticuerpo. 2. Adición de la muestra problema con la mezclade antígenos o anticuerpos. 3. Unión del antígeno o anticuerpo específico al anticuerpo o antígeno tapizado en el pocillo 4. Lavado del pocillo para eliminar el exceso de antígeno o anticuerpo nounido 5. Adición del anticuerpo secundario marcado con la enzima 6. Unión del anticuerpo secundario al antígeno o anticuerpo 7. Lavado del pocillo para eliminar el exceso de enzima no unida 8. Adicióndel substrato 9. Unión del substrato a la enzima 10. Desarrollo del color |

Tipos de Prueba ELISA:
ELISA Directo:
a) Se fijara un antígeno específico al soporte o tapizado del recipiente.
b) Seremoverá el fluido para retirar antígenos no acoplados a las paredes del recipiente.
c) Se añade un anticuerpo conjugados con una enzima. Si los anticuerpos corresponden al antígeno quedaran fijadosy no podrán ser removidos al quitar el fluido del recipiente.
d) Se adiciona un sustrato de reacciona con la enzima marcadora y la diferencia de colores determinara el resultado.

ELISAIndirecto:
a) Se fijara un antígeno específico para el anticuerpo que se quiere hallar en el estudio.
b) Lavar para remover antígenos mal fijados y verter el suero de estudio. El suero contendrá los...
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