Polifenoles

version date: 1 December 2006

PRÁCTICA VI.3 EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE POLIFENOLES DE ALGAS MARINAS EVALUATION OF ANTIOXIDANT ACTIVITY OF POLYPHENOLIC COMPOUNDS FROM MARINE ALGAE
Argimiro Rivero Rosales Facultad de Ciencias del Mar (Universidad de Las Palmas de Gran Canaria). Edificio Ciencias Básicas. Campus de Tafira s/n. 35017 Las Palmas de Gran Canaria (España)arivero@dqui.ulpgc.es Juana Rosa Betancort Rodríguez Instituto Tecnológico de Canarias. Playa de Pozo Izquierdo s/n. 35119 Santa Lucía. (España)

RESUMEN La formación de radicales libres mediante procesos naturales conduce a la oxidación de biomoléculas, dando lugar a diversas enfermedades. Los organismos fotosintéticos están expuestos a ambientes muy oxidativos, por lo que poseen un sistema antioxidantemuy eficaz. Presentamos en este trabajo un sencillo método para la extracción y evaluación de la actividad antioxidante de los polifenoles de algas marinas. La concentración de polifenoles se determina siguiendo el método de Folin-Ciocalteu, y la medición de la actividad antioxidante se realiza por el método del DPPH. INTRODUCCIÓN La excesiva oxidación de biomoléculas da lugar a diversos daños enel organismo (1). Así, un exceso de radicales libres se ha relacionado con una mayor incidencia de diversas enfermedades degenerativas (1) como cáncer, enfermedades cardiacas, inflamación, artritis, disfunción cerebral, aceleración del envejecimiento (2), etc. El mecanismo por el que los radicales libres producen sus efectos transcurre mediante una reacción radicalaria, en la que se forman especiasreactivas oxigenadas, que son los que producen los efectos nocivos. Este proceso se ve favorecido por la presencia de oxígeno y de luz ultravioleta, que inicia la formación de radicales libres. La utilización de antirradicales permite que no se produzcan las especies reactivas oxigenadas (por esto, también se les suele llamar antioxidantes), de forma que se impiden las consecuencias de suactividad (3,4). Estos antirradicales actúan principalmente en reacciones de terminación de cadenas de radicales libres. Impidiendo la oxidación de lípidos y otras moléculas cediendo átomos de hidrógeno de forma que se neutralizan los radicales libres. La naturaleza ofrece una gran oportunidad para el descubrimiento de nuevos compuestos naturales con diversas actividades (5), especialmente en aquellaszonas con una gran flora autóctona (6). Las plantas y algas marinas están sometidas a una intensa radiación ultravioleta y una alta concentración de oxígeno en su entorno. Pero los efectos nocivos de los radicales libres producidos en estas condiciones, son neutralizados por antioxidantes naturales (7). En esta práctica se pretende estudiar la actividad antioxidante de algas marinas, ya que es bienconocido que las algas pardas (Phaeophyta) poseen altas concentraciones de compuestos

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antioxidantes (8,9,10) formados por polímeros de unidades de floroglucinol (1,3,5trihidroxibenceno) y denominados polifenoles. OBJETIVOS En esta práctica se extraerán polifenoles de algas marinas y se valorará su concentración y actividad antioxidante mediante tres pasos• • • Extracción de polifenoles Determinación de la concentración de polifenoles en los extractos Determinación de la capacidad reductora de los extractos

MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPOS Algas marinas pardas (frescas o desecadas) Espectrofotómetro UV-visible y cubetas de cuarzo Nevera Balanza Agitador Material básico: Matraces aforados de 10 mL Erlenmeyer 250 mL Probeta 100 mL Pipetas de 0.05, 0.5y 10 mL Filtración a vacío Disolventes: Agua destilada Metanol Reactivos: Ácido acético glacial Na2CO3 20 % Floroglucinol [CAS nº: 108-73-6] Reactivo Folin- Ciocalteu [MDL nº: MF CD00132625] Polivinilpolipirrolidona (PVPP) [CAS nº: 25249-54-1] 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) [CAS nº: 1898-66-4] MÉTODO I) Extracción de polifenoles de algas pardas: Se pesan 3-4 g de algas pardas secas (o...