Proteinas totales

TOTAL PROTEIN

Proteínas Totales
Biuret. Colorimétrico
Determinación cuantitativa de proteínas totales IVD
Conservar a 2-8ºC CÁLCULOS PRINCIPIO DEL MÉTODO En medio alcalino, las proteínas dan un intenso color violeta azulado en presencia de sales de cobre; contiene yoduro como antioxidante. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de proteína total en la muestraensayada1,4. SIGNIFICADO CLÍNICO Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo. Actúan como elementos estructurales y de transporte. Se dividen en dos fracciones, albúmina y globulinas. Su determinación es útil en la detección de: - Hiperproteinemia producida por hemoconcentración, deshidratación o aumento en la concentración de proteínasespecificas. - Hipoproteinemia por hemodilución debida a un defecto en la síntesis proteica, perdidas excesivas (hemorragias) o catabolismo proteico excesivo4,5. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. REACTIVOS R Biuret Potasio sodio tartrato Yoduro sódico Yoduro de potasio Sulfato de cobre (II) 15 mmol/L 100 mmol/L 5 mmol/L 5 mmol/L
( A )Muestra x 7 (Conc. Patrón) = g/dL de proteínas totales ( A ) Patrón

4. 5.

Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC o 10 minutos a Tª ambiente. Leer la absorbancia (A) del Patrón y la muestra, frente al Blanco de reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.

CONTROL DE CALIDAD Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120y 1002210). Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias. VALORES DE REFERENCIA1 Adultos: 6,6 – 8,3 g/dL Recién nacidos: 5,2 – 9,1 g/dL Estos valores son orientativos. Esrecomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO Rango de medida: Desde el límite de detección de 0,20 g/dL hasta el límite de linealidad de 15 g/dL. Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2. Precisión: Media (g/dL) SD CV (%) Intraserie (n= 20)5,07 9,64 0,04 0,08 0,88 0,90 Interserie (n= 20) 5,15 9,74 0,06 0,14 1,23 1,43

T PROTEIN CAL Patrón primario de Albúmina Bovina 7 g/dL PREPARACION Los reactivos están listos para su uso. CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evitasu contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. T PROTEIN CAL
Una vez abierto, es estable 1 mes si se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.

Sensibilidad analítica: 1 g/dL = 0,07 A. Exactitud: Los reactivos de SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales(x). Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes: Coeficiente de correlación (r): 0,9918 Ecuación de la recta de regresión: y= 1,0164x – 0,1264. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado. INTERFERENCIAS Hemoglobina y lipemia1,4. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de las proteinas2,3. NOTAS 1. Lacalibración con el Patrón acuoso puede dar lugar a errores sistemáticos en métodos automáticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores séricos. 2. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación. 3. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores. BIBLIOGRAFÍA
1. 2. 3. 4. 5. Koller A. Total serum protein....