Actividad enzimatica

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Enzimas y Actividad Enzimática

De la Cruz Víctor Manuel, Chañag Harold Andrés, Narváez Cristina
Universidad De Nariño. Facultad de Ciencias Agrícolas. Programa de Ingeniería agronómica
Sede Torobajo, Cra 18 Calle 50, Pasto, Colombia

Fecha de practica 18 Octubre 2011 - Fecha entrega 25 Octubre 2011
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Resumen: La práctica se realizo con elfin de experimentar y reconocer las diferentes reacciones químicas especificas para determinar la presencia de enzimas en productos de origen animal o vegetal, utilizando un catalizador inorgánico (MnO2) y un catalizador orgánico (peroxidasa) sobre cada sustrato. Se evaluó además la acción de la catalasa, peroxidasa y tirosinasa en las enzimas.
Palabras claves: Catalizador, enzimas, reacciónquimica.

INTRODUCCION:

En los organismos vivos se desarrollan simultáneamente multitud de reacciones químicas, las cuales no serian posibles a las condiciones del organismo (en una solución diluida, pH neutro, y una temperatura de 36-37 ºC) sin la presencia de una clase de proteínas llamadas enzimas, que actúan como biocatalizadores, que aceleran las reacciones.

Estas enzimas llevanpropiedades especificas, cada conversión de sustrato, a producto esta catalizado por una enzima determinada. Las enzimas también están sometidas a una regulación intracelular o extracelular, por lo cual su actividad catalítica, se puede reducir o aumentar.

Los enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Los enzimas son catalizadores, es decir, sustancias que, sinconsumirse en una reacción, aumentan notablemente su velocidad. No hacen factibles las reacciones imposibles, sino que solamente aceleran las que espontáneamente podrían producirse. Ello hace posible que en condiciones fisiológicas tengan lugar reacciones que sin catalizador requerirían condiciones extremas de presión, temperatura o pH.

OBJETIVOS

* Determinar la presencia de enzimas en productosde origen animal o vegetal mediante reacciones químicas específicas.

* Identificar la acción de la catalasa, peroxidasa, tirosinasa.

* Estudiar el efecto de una enzima (peroxidasa) presente en animales y vegetales.

* Comparar la acción de un catalizador inorgánico (MnO2) y un catalizador orgánico (peroxidasa) sobre el mismo sustrato (H2O2)

MATERIALES Y REACTIVOS

Papa cruda,trozos de tomate, jugo de limón, zanahoria, hígado, rábano. Gradillas con tubos de ensayos, Beakers, pinzas para tubo de ensayo, termómetro, mortero, varilla de agitación, mechero, placa de calentamiento, trípode, pipetas, cronometro, gotero, vasos de precipitado, embudo, erlenmeyer.

PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS

Análisis Cualitativo
Ensayo 1. Reconocimiento de la Catalasa (papa cruda, trozosde tomate, jugo de limón, zanahoria, rabano).
En varios tubos de ensayos se coloco las diferentes muestras de tejidos vegetales y se agrego al mismo tiempo 5 ml H2O2 y se cronometro el tiempo de reacción de cada muestra.

Tabla No 1.

Material | Nivel de Reacción | Características |
Papa | Alto | Inmediatamente hubo reacción, que se noto por un desprendimiento alto de oxigeno, que llegoal punto de rebotarse del tubo. |
Rábano | Medio | En los dos, el nivel de reacción fue igual; se noto desprendimiento de no muy alto oxigeno de una manera lenta. |
Tomate | Medio | |
Zanahoria | Bajo | La reacción fue muy lenta y el desprendimiento de oxigeno fue mínimo |
Jugo Limón | Mínima | No presento ningún desprendimiento de oxigeno. |

Ensayo 2. Determinación de laPeroxidasa.

Prueba de la bencidina: A un ml de extracto acuoso de rábano (filtrado) se agrego 5 gotas de solución alcohólica de bencidina y posteriormente dos gotas de H2O2 al 2% y se agito suavemente.

Prueba de Pirogalol: Se tomo una pequeña cantidad de la papa rayada sin exprimir y se coloco en un tubo de ensayo y se añadió 1ml de pirogalol al 1% y dos gotas de H2O2 al 2%.

Determinación de la...
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